大鼠 OT ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 OT ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试【shì】剂取出放【fàng】置30分钟，平衡至室温，所有【yǒu】标准【zhǔn】品和【hé】样【yàng】品【pǐn】必需【xū】设置平【píng】行对【duì】照实验，快速加入试剂至样品中【zhōng】，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依【yī】据【jù】实【shí】验键【jiàn】盘纸决【jué】定酶标条的使用量，将剩【shèng】余的酶【méi】标条【tiáo】连同干燥剂【jì】一起放回密封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个【gè】微【wēi】孔【kǒng】中，除了【le】TA（全活【huó】性）孔和【hé】Blank（空白）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶【ǒu】联酶至【zhì】各【gè】孔中，除了TA（全活性）孔和【hé】Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗【kàng】体【tǐ】工作液至各孔中，除了【le】TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和【hé】NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置于【yú】孔板振动器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸【zhǐ】上拍干微孔内溶液，加洗涤液【yè】400μL每孔【kǒng】洗3次，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔【kǒng】，在【zài】干净的无尘吸【xī】水纸上【shàng】轻巧酶标板数【shù】次，以确保没有【yǒu】洗涤液残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色【sè】底物溶液，于室温静置5~30分钟。（显【xiǎn】色底物A和B需【xū】在临用前15分【fèn】钟内等体【tǐ】积混合，并避光放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶【méi】标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光【guāng】密度值，在【zài】570nm至590nm之间好有修正，如果酶标仪不能【néng】自动清【qīng】除Blank(空白)孔值，那么手动扣除每【měi】个读【dú】数【shù】的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用【yòng】户【hù】在初次使【shǐ】用试剂盒时【shí】，应将各种试剂管离【lí】心数分钟，以便试【shì】剂集中到【dào】管底。

2. 每次【cì】实验留一孔作为空白调零孔，该孔【kǒng】不加【jiā】任何试剂，只是zui后加【jiā】底物溶液及2N H2SO4，测量时先用【yòng】此孔【kǒng】调【diào】OD值至零。

3. 为防止【zhǐ】样品蒸【zhēng】发【fā】，试验时将反应板【bǎn】放于铺有【yǒu】湿布的密闭盒【hé】内，酶标板【bǎn】加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者试【shì】剂，请于9-23℃保存，标准【zhǔn】品【pǐn】、生物-素【sù】标记抗体工作液、辣根过【guò】氧化物酶【méi】标记亲【qīn】和素【sù】工作液请依据【jù】所需的量配置使用，请【qǐng】勿重复使用已稀释过的【de】标准【zhǔn】品、生物-素标记抗体工【gōng】作液或【huò】、辣【là】根过氧化物【wù】酶标记亲【qīn】和【hé】素工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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