大鼠 PRL ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 PRL ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各【gè】种试剂取出放【fàng】置30分【fèn】钟，平衡【héng】至【zhì】室温，所有【yǒu】标准品【pǐn】和样品必需设置平【píng】行对照实【shí】验，快速【sù】加入试剂至样品中，立即【jí】漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实【shí】验【yàn】键盘纸【zhǐ】决定酶标条的使【shǐ】用量，将剩余的酶标条连【lián】同干燥剂【jì】一起放回密封【fēng】塑料袋，密封【fēng】，4℃保存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至各【gè】个微孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结【jié】合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结【jié】合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各【gè】孔中，除了【le】TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白【bái】）孔【kǒng】。

8. 移取50μL 抗体工作液【yè】至各【gè】孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和【hé】NSB（非特异结合【hé】）孔。

9. 将酶标孔置于孔【kǒng】板振动器上，250~500rpm，室【shì】温孵育【yù】2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸上拍干【gàn】微孔内溶【róng】液【yè】，加【jiā】洗涤液400μL每孔洗3次，每【měi】次需拍干。

11. 后【hòu】一次洗【xǐ】涤【dí】，清【qīng】空各微孔，在干净【jìng】的无尘吸水纸上轻巧酶标【biāo】板数次，以确【què】保没【méi】有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色底【dǐ】物溶液，于室温【wēn】静置5~30分钟。（显【xiǎn】色底物A和B需在临【lín】用前【qián】15分钟内等【děng】体积混合，并【bìng】避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标【biāo】仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光【guāng】密度【dù】值，在570nm至590nm之间好【hǎo】有修【xiū】正，如果酶标仪不【bú】能【néng】自动清除Blank(空白【bái】)孔值，那【nà】么手动扣除每个读【dú】数的Blank（空白）孔光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试【shì】剂盒时，应【yīng】将【jiāng】各种【zhǒng】试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底【dǐ】。

2. 每次实验【yàn】留一孔作【zuò】为空【kōng】白调零孔【kǒng】，该孔不加任何试【shì】剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时先用此【cǐ】孔【kǒng】调【diào】OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试【shì】验【yàn】时【shí】将反应板放于铺有【yǒu】湿布的密【mì】闭盒内，酶标板【bǎn】加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板或【huò】者试【shì】剂，请于9-23℃保存，标【biāo】准品【pǐn】、生物-素【sù】标【biāo】记抗体工作液、辣根【gēn】过氧化【huà】物酶标【biāo】记亲和素工作液请依据【jù】所【suǒ】需的量【liàng】配置使用，请勿重复使用已稀释过的标准品【pǐn】、生物-素标记抗体工作液【yè】或、辣根过氧化物酶标记亲【qīn】和素【sù】工【gōng】作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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