大鼠 LH ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 LH ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将各种试【shì】剂取出放置【zhì】30分钟【zhōng】，平衡至室温【wēn】，所有标准品和样【yàng】品必需设置平行对照实验，快速加入【rù】试剂【jì】至样品中，立即漩涡【wō】震【zhèn】荡2秒【miǎo】混匀。

1. 依【yī】据实验键盘纸决定酶标条的使用【yòng】量，将剩余的酶标条连同干燥剂一【yī】起放回密【mì】封塑【sù】料袋，密【mì】封，4℃保【bǎo】存【cún】。

2. 移取50μL中和【hé】液至各个微孔中【zhōng】，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异结【jié】合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶【méi】至各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔中，除了TA（全【quán】活【huó】性）孔、Blank（空白）孔和【hé】NSB（非【fēi】特异结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置于孔【kǒng】板振动【dòng】器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸上拍【pāi】干微孔内溶液，加洗涤【dí】液400μL每孔洗3次，每【měi】次需拍干。

11. 后一次【cì】洗涤，清空各微【wēi】孔，在干【gàn】净的无尘【chén】吸【xī】水【shuǐ】纸上轻【qīng】巧酶标板数【shù】次，以确保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底物溶液【yè】，于室温静【jìng】置5~30分钟。（显色【sè】底物A和【hé】B需在【zài】临【lín】用【yòng】前15分钟内等体积混合，并避光放置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密度值，在【zài】570nm至590nm之间【jiān】好有修正【zhèng】，如【rú】果酶【méi】标【biāo】仪不能自动清除Blank(空白)孔值，那么【me】手动扣除每个读数的Blank（空白）孔光密【mì】度【dù】值。

注意事项：

1. 用户在初次【cì】使用【yòng】试【shì】剂盒时，应将各种试剂管离心【xīn】数分钟，以便试剂集中到【dào】管【guǎn】底【dǐ】。

2. 每【měi】次实验【yàn】留一【yī】孔作为空白调零孔，该孔不加【jiā】任【rèn】何试剂，只是zui后加底物溶【róng】液及2N H2SO4，测量时【shí】先【xiān】用此【cǐ】孔调OD值至零。

3. 为防止【zhǐ】样品【pǐn】蒸【zhēng】发，试验时将反应板放于铺有湿【shī】布的密闭【bì】盒内，酶标板【bǎn】加上盖或【huò】覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者试剂，请【qǐng】于9-23℃保存，标准品、生【shēng】物-素标记抗体【tǐ】工作液、辣【là】根过氧【yǎng】化【huà】物【wù】酶标记亲和素工作液【yè】请【qǐng】依据所需的量配置使用，请勿重复【fù】使用已稀释过【guò】的标【biāo】准品、生物-素标【biāo】记抗【kàng】体【tǐ】工【gōng】作液或、辣根【gēn】过氧化物酶【méi】标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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