大鼠 E ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 E ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试【shì】剂【jì】取出放置30分钟，平【píng】衡至室温，所有标准【zhǔn】品和样【yàng】品必需设置平行【háng】对照实验【yàn】，快速加入【rù】试剂至样【yàng】品【pǐn】中，立即漩【xuán】涡【wō】震荡2秒混匀。

1. 依据实【shí】验【yàn】键盘纸决定酶标【biāo】条的使用量，将【jiāng】剩余的【de】酶标条连同【tóng】干燥剂一起放回【huí】密封塑料袋【dài】，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中和【hé】液至各个微孔中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结合)孔【kǒng】和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特异结合）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶至各孔中【zhōng】，除【chú】了TA（全活性【xìng】）孔和【hé】Blank（空白【bái】）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液【yè】至各孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白【bái】）孔和【hé】NSB（非特异结【jié】合）孔。

9. 将酶标孔置于【yú】孔板【bǎn】振动器上，250~500rpm，室【shì】温孵育【yù】2小时。

10. 在吸水纸上拍【pāi】干微孔内溶【róng】液，加【jiā】洗涤液400μL每孔洗【xǐ】3次，每次需拍【pāi】干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在【zài】干净的无尘吸水纸上【shàng】轻巧酶标【biāo】板数次【cì】，以确保【bǎo】没有洗涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色底物溶液【yè】，于室温静置【zhì】5~30分钟。（显色底物A和B需在临用【yòng】前15分钟【zhōng】内等体积【jī】混【hún】合，并避光【guāng】放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶标仪Blank（空白）孔值【zhí】，读取450nm处的【de】光密度值，在570nm至590nm之【zhī】间好有【yǒu】修正，如【rú】果酶【méi】标仪不能自动【dòng】清除Blank(空白)孔【kǒng】值，那么手【shǒu】动【dòng】扣除每个读数的Blank（空白）孔光密度【dù】值【zhí】。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次使【shǐ】用试剂【jì】盒时，应将【jiāng】各【gè】种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到【dào】管底【dǐ】。

2. 每次实验留一【yī】孔作为空白调零孔，该孔【kǒng】不加任何试【shì】剂，只是zui后【hòu】加【jiā】底物溶液及【jí】2N H2SO4，测量时【shí】先用此【cǐ】孔调OD值至零。

3. 为防止样品【pǐn】蒸发，试验时将【jiāng】反应板放【fàng】于铺有湿【shī】布的密闭盒内，酶标板加上【shàng】盖【gài】或【huò】覆膜。

4. 未使用完的酶标【biāo】板或者试剂，请于9-23℃保【bǎo】存，标【biāo】准品、生【shēng】物-素标记抗体工【gōng】作【zuò】液【yè】、辣根过氧化物酶标记亲和素【sù】工作液请依据所【suǒ】需的量【liàng】配置使用【yòng】，请勿重复使【shǐ】用已稀释过的标准【zhǔn】品【pǐn】、生物-素标记抗体工作液【yè】或、辣根【gēn】过氧化【huà】物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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