大鼠 malonylCoA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 malonylCoA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各【gè】种试剂取出【chū】放置30分钟，平衡至室【shì】温【wēn】，所有标【biāo】准【zhǔn】品和样【yàng】品必需设置平行对【duì】照实验，快速加【jiā】入试剂至样品【pǐn】中，立即漩【xuán】涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决【jué】定酶标条的使用【yòng】量，将【jiāng】剩余的【de】酶标条【tiáo】连同干燥剂【jì】一起放回密【mì】封塑料袋，密【mì】封【fēng】，4℃保存。

2. 移取50μL中和液【yè】至各【gè】个微孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空【kōng】白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结【jié】合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异【yì】结合）孔。

7. 移【yí】取【qǔ】50μL 偶联酶【méi】至各【gè】孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔【kǒng】、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非特异【yì】结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置于孔板振动【dòng】器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水【shuǐ】纸上【shàng】拍干微孔内溶液，加洗【xǐ】涤液400μL每孔洗3次，每【měi】次需拍干。

11. 后【hòu】一次洗涤，清空各微孔，在干净的无【wú】尘吸水纸上轻巧酶标【biāo】板数次，以【yǐ】确保没【méi】有洗涤液残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显【xiǎn】色底物【wù】溶液，于室温静置5~30分钟【zhōng】。（显色底【dǐ】物A和B需在临【lín】用前15分钟内等体积混合，并避光放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶标仪Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】值，读取【qǔ】450nm处的光密度值，在570nm至590nm之间好有修正，如果酶标仪【yí】不能自动【dòng】清除Blank(空【kōng】白【bái】)孔值【zhí】，那【nà】么手动扣除每个读数的Blank（空【kōng】白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初【chū】次【cì】使用试【shì】剂盒时，应将各种【zhǒng】试剂管离心数分钟【zhōng】，以便【biàn】试剂集中到【dào】管底。

2. 每次实【shí】验留一【yī】孔作为空白调【diào】零孔，该孔不【bú】加任何试剂，只是zui后【hòu】加底物溶液及【jí】2N H2SO4，测量时先用此孔【kǒng】调OD值至【zhì】零。

3. 为防止样品【pǐn】蒸【zhēng】发，试验时将反应板放于铺【pù】有【yǒu】湿布的密闭【bì】盒内，酶标【biāo】板加上盖【gài】或覆膜。

4. 未【wèi】使用完的【de】酶标板或者试剂【jì】，请于【yú】9-23℃保存，标准品、生物-素标【biāo】记抗体工作【zuò】液、辣根过氧化物酶标记亲和【hé】素工作液【yè】请【qǐng】依据所需【xū】的量【liàng】配【pèi】置使用，请勿【wù】重复使用【yòng】已稀释【shì】过的标准品、生物-素标记抗体【tǐ】工【gōng】作液或【huò】、辣根过氧化物酶标【biāo】记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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