大鼠 C3a ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 C3a ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将【jiāng】各种试剂取出放置30分钟，平【píng】衡【héng】至室【shì】温，所【suǒ】有标【biāo】准品和样品必需设置平行对【duì】照实验【yàn】，快速加入试剂至样【yàng】品中，立即漩涡【wō】震荡2秒【miǎo】混匀。

1. 依据实【shí】验键盘纸决定酶【méi】标条的【de】使用量【liàng】，将剩余的【de】酶标条连同干燥剂【jì】一起放【fàng】回密封塑料【liào】袋，密封【fēng】，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个微孔【kǒng】中【zhōng】，除了TA（全活性）孔【kǒng】和【hé】Blank（空白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特异结合）孔。

7. 移【yí】取【qǔ】50μL 偶联【lián】酶至各孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体【tǐ】工【gōng】作液至各孔中，除【chú】了TA（全活【huó】性）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和【hé】NSB（非特【tè】异结合）孔。

9. 将酶标孔置【zhì】于孔板振【zhèn】动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵【fū】育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸上拍干微【wēi】孔内溶液，加洗【xǐ】涤液400μL每孔【kǒng】洗3次【cì】，每【měi】次【cì】需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在【zài】干净的无【wú】尘吸水纸上【shàng】轻巧酶标板数【shù】次，以确【què】保没有洗【xǐ】涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色底物溶液，于室温【wēn】静【jìng】置【zhì】5~30分钟。（显色底【dǐ】物【wù】A和B需在【zài】临用前15分钟内等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白【bái】）孔值，读取450nm处的光密【mì】度值，在570nm至590nm之【zhī】间【jiān】好【hǎo】有修正，如【rú】果【guǒ】酶标仪【yí】不能自动清除Blank(空白)孔【kǒng】值，那么手动【dòng】扣除每个读数的Blank（空白【bái】）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用【yòng】试剂【jì】盒时【shí】，应将各种试剂管离心数分钟，以【yǐ】便试【shì】剂集中到管【guǎn】底。

2. 每次实【shí】验留一孔作【zuò】为【wéi】空白调零孔，该【gāi】孔不【bú】加任【rèn】何试剂【jì】，只是zui后加底物溶液【yè】及2N H2SO4，测量时先用此孔调【diào】OD值至零。

3. 为防【fáng】止样品【pǐn】蒸发，试【shì】验【yàn】时将反应板【bǎn】放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加【jiā】上盖或覆膜。

4. 未【wèi】使用完的酶标板或【huò】者试剂，请于9-23℃保存，标准品【pǐn】、生【shēng】物-素【sù】标记【jì】抗体工作液、辣根过【guò】氧【yǎng】化物酶标【biāo】记亲和素工【gōng】作液请依据所需的量【liàng】配置使用，请勿重复使用已稀释【shì】过【guò】的标【biāo】准品、生物-素【sù】标记抗体工作【zuò】液或、辣根过氧化物【wù】酶标记亲和素工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

大鼠 C3a ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）由上海酶【méi】联生物现货供应，包括C3a ELISA试剂盒、酶联免疫检测试【shì】剂盒说明书【shū】、实验原理、操作步【bù】骤等【děng】产品详细【xì】介绍。