大鼠 Caspase8 试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 Caspase8 试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种【zhǒng】试剂取【qǔ】出放置【zhì】30分钟【zhōng】，平衡至室温，所有标准品和样【yàng】品必需【xū】设置平行对照实验，快【kuài】速加【jiā】入【rù】试剂至【zhì】样品中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实【shí】验【yàn】键盘纸【zhǐ】决定酶【méi】标条【tiáo】的使用量，将剩余【yú】的酶标条连同【tóng】干燥剂一起放回密封塑【sù】料袋，密【mì】封，4℃保存。

2. 移取50μL中和【hé】液至各个微孔中，除了TA（全活【huó】性）孔【kǒng】和Blank（空【kōng】白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特【tè】异【yì】结【jié】合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结【jié】合）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶【méi】至各【gè】孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔【kǒng】和【hé】Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至【zhì】各孔中【zhōng】，除了TA（全活【huó】性【xìng】）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置于孔板振动器【qì】上，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时【shí】。

10. 在吸水纸上拍干微孔内溶液，加【jiā】洗涤【dí】液400μL每孔【kǒng】洗3次，每次需【xū】拍干。

11. 后一【yī】次【cì】洗【xǐ】涤，清空各微孔，在干净的无尘吸水纸上轻巧酶标板数次【cì】，以【yǐ】确保【bǎo】没有洗涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色底物溶液，于室【shì】温静置5~30分钟。（显色底【dǐ】物A和B需在临用前【qián】15分钟【zhōng】内【nèi】等体积【jī】混【hún】合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标【biāo】仪【yí】Blank（空白【bái】）孔值，读取450nm处的光密度值【zhí】，在【zài】570nm至590nm之间好有修正，如果酶标仪不能自动清除【chú】Blank(空白【bái】)孔值，那么【me】手动【dòng】扣除每个读【dú】数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初【chū】次使用【yòng】试【shì】剂盒时，应将各种试【shì】剂管离心数分钟，以便试剂【jì】集中【zhōng】到管底【dǐ】。

2. 每【měi】次实验留一孔作【zuò】为空白【bái】调零【líng】孔，该孔【kǒng】不加任何试【shì】剂【jì】，只是zui后加底【dǐ】物溶【róng】液及2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值至零。

3. 为防止样品蒸【zhēng】发【fā】，试验【yàn】时将反应【yīng】板放于铺有湿布的密闭盒内，酶【méi】标板加上盖或覆膜【mó】。

4. 未使用完的酶标【biāo】板或者试剂【jì】，请【qǐng】于9-21℃保存【cún】，标准品、生物-素标记抗体工作【zuò】液、辣根过氧化物酶标【biāo】记亲和素工【gōng】作液请依据所需的量【liàng】配置使用，请勿重复使用已稀释过的【de】标准品、生【shēng】物-素标记抗【kàng】体工【gōng】作液或、辣根过氧【yǎng】化【huà】物酶标记亲【qīn】和素工作【zuò】液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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