大鼠 IL-8 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 IL-8 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将各种试剂取【qǔ】出放置【zhì】30分钟，平衡【héng】至室温，所有标【biāo】准【zhǔn】品和样【yàng】品必需【xū】设【shè】置平行【háng】对照实验，快速加入试剂至样品中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决定【dìng】酶标【biāo】条的【de】使【shǐ】用量，将剩余的酶标条连同【tóng】干【gàn】燥剂一起【qǐ】放回密封塑料袋【dài】，密封，4℃保存。

2. 移【yí】取50μL中和液【yè】至各个微孔【kǒng】中，除【chú】了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结【jié】合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结【jié】合【hé】）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中【zhōng】，除了TA（全【quán】活性）孔【kǒng】和Blank（空【kōng】白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各【gè】孔【kǒng】中【zhōng】，除了TA（全【quán】活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特【tè】异结合）孔。

9. 将酶标孔置于【yú】孔板振动【dòng】器上【shàng】，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸上拍干微孔内【nèi】溶液【yè】，加【jiā】洗【xǐ】涤液【yè】400μL每孔洗3次，每次需拍干【gàn】。

11. 后一次洗【xǐ】涤，清空各微孔，在干净【jìng】的无尘吸【xī】水纸【zhǐ】上轻巧酶标板数次，以确保【bǎo】没有洗涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底物溶液【yè】，于【yú】室温【wēn】静【jìng】置5~30分钟。（显色底物A和B需在临用前15分钟内等体【tǐ】积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空【kōng】白）孔值，读取【qǔ】450nm处的【de】光密度【dù】值，在【zài】570nm至590nm之间好有修正，如果【guǒ】酶标仪不能自【zì】动清除Blank(空白)孔值【zhí】，那么手动扣除每个读数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次【cì】使用【yòng】试剂盒时，应将各种试剂【jì】管离【lí】心数分钟，以便【biàn】试剂集中到【dào】管底。

2. 每次实验【yàn】留一孔作为【wéi】空白【bái】调零孔，该孔不【bú】加任【rèn】何试剂，只是zui后【hòu】加底物溶液及【jí】2N H2SO4，测量【liàng】时先【xiān】用此孔调OD值至零。

3. 为防止【zhǐ】样品蒸发，试【shì】验时将反应板放于铺有湿布【bù】的密闭盒内，酶标板加上【shàng】盖或【huò】覆膜【mó】。

4. 未使用完【wán】的【de】酶标板或【huò】者试剂【jì】，请【qǐng】于【yú】9-23℃保存，标准【zhǔn】品、生物-素标【biāo】记【jì】抗体工【gōng】作【zuò】液、辣根过氧化物酶标记亲【qīn】和素工作液请依据所需的量配置使用，请【qǐng】勿重复使用已稀【xī】释【shì】过的标准品【pǐn】、生物-素标【biāo】记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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