大鼠 IL-6 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 IL-6 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种【zhǒng】试【shì】剂取出放置30分钟，平衡【héng】至室【shì】温，所【suǒ】有标准【zhǔn】品和样【yàng】品【pǐn】必需设置平行对照实验，快速加入试剂至样品中，立即漩涡震荡2秒混【hún】匀【yún】。

1. 依据实验键盘【pán】纸决定酶标【biāo】条的使用量【liàng】，将【jiāng】剩【shèng】余的酶标条【tiáo】连【lián】同干燥剂一起放回密封塑料袋，密封【fēng】，4℃保存【cún】。

2. 移取【qǔ】50μL中和液至各个【gè】微孔中【zhōng】，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔【kǒng】和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔【kǒng】。

7. 移取50μL 偶【ǒu】联酶至【zhì】各孔中，除【chú】了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作【zuò】液至各【gè】孔中，除了TA（全活【huó】性）孔【kǒng】、Blank（空白）孔和NSB（非【fēi】特异结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置【zhì】于【yú】孔板振【zhèn】动【dòng】器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸上拍干微孔【kǒng】内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每孔洗【xǐ】3次，每次需拍干【gàn】。

11. 后【hòu】一次洗涤，清空各微【wēi】孔，在干净【jìng】的无【wú】尘吸【xī】水纸上【shàng】轻巧酶标【biāo】板数次，以确保没有洗涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶【róng】液【yè】，于室温静置5~30分钟。（显色底【dǐ】物A和B需在【zài】临用前15分钟内【nèi】等体积混合，并【bìng】避光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标【biāo】仪Blank（空【kōng】白）孔值，读【dú】取450nm处的光密度值，在570nm至590nm之间好有修正，如果酶标仪不能自动清除Blank(空白)孔值【zhí】，那么手动扣除每【měi】个读【dú】数【shù】的Blank（空白）孔光【guāng】密度值【zhí】。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时，应将【jiāng】各种【zhǒng】试剂管离心数【shù】分钟，以【yǐ】便试剂【jì】集中到管【guǎn】底。

2. 每次【cì】实验留一孔作为空白调【diào】零孔，该【gāi】孔【kǒng】不加任何试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时【shí】先用此孔调【diào】OD值至零。

3. 为防【fáng】止【zhǐ】样品蒸发，试验时将反【fǎn】应板放于铺有湿布【bù】的【de】密闭盒内，酶标【biāo】板加上盖或覆膜。

4. 未使【shǐ】用完的酶标【biāo】板【bǎn】或者试剂，请于9-23℃保存，标准品、生物【wù】-素标记抗体工【gōng】作液、辣根过氧化【huà】物酶【méi】标【biāo】记亲和素工作液请依据所【suǒ】需的量配置使用【yòng】，请勿【wù】重复使用已稀释过的标【biāo】准【zhǔn】品、生【shēng】物-素标记【jì】抗体工作液【yè】或、辣根过氧【yǎng】化【huà】物【wù】酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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