大鼠 IL-12 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 IL-12 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将各种【zhǒng】试剂取出放置【zhì】30分钟，平【píng】衡【héng】至【zhì】室【shì】温，所有标准品和【hé】样品必需设置平行对照实验，快【kuài】速加入试剂至【zhì】样品【pǐn】中，立即漩涡震【zhèn】荡2秒混匀。

1. 依【yī】据实验键盘纸决定酶标【biāo】条的【de】使【shǐ】用量，将【jiāng】剩余的酶标条连【lián】同干燥剂一起放回密【mì】封塑【sù】料【liào】袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至各【gè】个微【wēi】孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结【jié】合)孔【kǒng】和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特【tè】异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空【kōng】白【bái】）孔。

8. 移取50μL 抗【kàng】体工【gōng】作液至各孔中，除了【le】TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非【fēi】特异结合）孔【kǒng】。

9. 将酶标孔置于孔板振动器上，250~500rpm，室【shì】温孵【fū】育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸上拍干【gàn】微【wēi】孔内溶液，加洗【xǐ】涤液400μL每孔洗【xǐ】3次【cì】，每次需拍干。

11. 后一次【cì】洗【xǐ】涤【dí】，清空各微【wēi】孔，在干净的无尘吸水纸【zhǐ】上轻【qīng】巧酶标板数【shù】次，以确保没有洗涤液残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色底物溶液，于【yú】室温静置5~30分钟。（显【xiǎn】色底物A和B需在临用前15分【fèn】钟内等体积混【hún】合【hé】，并避光放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶标仪Blank（空白【bái】）孔值，读取450nm处的光密度【dù】值，在570nm至590nm之间好有【yǒu】修正【zhèng】，如果酶标仪不能自【zì】动清【qīng】除Blank(空白)孔值，那么手动扣【kòu】除【chú】每个读【dú】数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时，应【yīng】将【jiāng】各【gè】种试【shì】剂管离心数分钟，以【yǐ】便试剂集中到管底【dǐ】。

2. 每次实验【yàn】留一【yī】孔作为空白调零【líng】孔，该孔不加任何试剂【jì】，只是zui后加底物【wù】溶液及【jí】2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值至【zhì】零。

3. 为防止样品蒸发，试验时【shí】将【jiāng】反应板放于铺有【yǒu】湿布的密【mì】闭盒内，酶标板【bǎn】加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于9-23℃保存，标准品【pǐn】、生物-素标记抗体工作液、辣根过氧化【huà】物酶标记亲和素工作液【yè】请【qǐng】依据所需【xū】的量配【pèi】置使用【yòng】，请勿【wù】重复使【shǐ】用【yòng】已稀【xī】释过的标准品【pǐn】、生物-素标记【jì】抗【kàng】体【tǐ】工【gōng】作液或、辣【là】根过氧化物酶【méi】标记【jì】亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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