大鼠 IL-18 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 IL-18 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取出【chū】放置30分钟，平【píng】衡【héng】至【zhì】室温，所有标准品和样品【pǐn】必需设置平【píng】行对【duì】照实验，快【kuài】速加入试剂至【zhì】样品【pǐn】中，立即漩涡震【zhèn】荡【dàng】2秒混匀。

1. 依据实验键【jiàn】盘【pán】纸决定酶标条【tiáo】的【de】使用量，将剩余的酶标条【tiáo】连同【tóng】干燥剂一起放回密【mì】封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至各【gè】个微孔中【zhōng】，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移【yí】取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔【kǒng】。

7. 移取50μL 偶【ǒu】联酶【méi】至各孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和【hé】Blank（空白【bái】）孔。

8. 移取50μL 抗体【tǐ】工【gōng】作【zuò】液至各孔中，除了【le】TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和【hé】NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔【kǒng】置于孔板【bǎn】振【zhèn】动【dòng】器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在【zài】吸水纸上拍【pāi】干微孔【kǒng】内溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每次需拍【pāi】干。

11. 后【hòu】一次【cì】洗涤，清【qīng】空各微孔，在干净【jìng】的【de】无【wú】尘吸水纸上轻巧酶标【biāo】板数【shù】次，以确保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色底物溶液，于室【shì】温静置【zhì】5~30分【fèn】钟。（显色底物A和B需在临用【yòng】前15分钟内等【děng】体积【jī】混【hún】合，并【bìng】避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪【yí】Blank（空白）孔【kǒng】值，读取450nm处的【de】光密度值，在570nm至590nm之间好【hǎo】有修正，如果【guǒ】酶标【biāo】仪不【bú】能自动清除Blank(空白)孔值，那么手【shǒu】动【dòng】扣除每个【gè】读【dú】数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次【cì】使用【yòng】试剂盒时，应将各【gè】种试剂管离心数分钟，以便试剂【jì】集【jí】中到【dào】管底。

2. 每次实验留【liú】一【yī】孔作【zuò】为空白调零孔，该孔不加【jiā】任何试剂，只【zhī】是【shì】zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值【zhí】至零。

3. 为防止【zhǐ】样品蒸发，试验时将反应板放于铺【pù】有湿布【bù】的密闭盒【hé】内，酶标板【bǎn】加上盖【gài】或【huò】覆膜。

4. 未使用完的酶标板【bǎn】或【huò】者试剂，请于【yú】9-23℃保存，标准品、生【shēng】物-素标记抗体工作【zuò】液、辣根过氧化【huà】物酶标记亲和素工作液请依据所【suǒ】需【xū】的量【liàng】配置使用【yòng】，请勿【wù】重【chóng】复使用【yòng】已稀【xī】释过的标【biāo】准品、生物-素标记抗体工作液或【huò】、辣根过氧【yǎng】化物酶标【biāo】记亲和素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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