大鼠 IL10 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 IL10 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将各种试剂取出放置30分钟【zhōng】，平衡【héng】至室温，所有标【biāo】准品【pǐn】和样【yàng】品必需设置平行【háng】对照实验【yàn】，快速加入试剂至样品中，立即漩【xuán】涡【wō】震荡2秒混匀。

1. 依【yī】据【jù】实验键盘纸决定酶标条【tiáo】的使用量，将【jiāng】剩余的酶标条连同干燥剂【jì】一起【qǐ】放回密封塑料袋，密封，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中和【hé】液至各个微孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔【kǒng】和Blank（空【kōng】白）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结【jié】合)孔和【hé】B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特异结合【hé】）孔。

7. 移取50μL 偶【ǒu】联【lián】酶【méi】至各孔中，除【chú】了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗体工【gōng】作【zuò】液至各孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白【bái】）孔和NSB（非特异【yì】结【jié】合）孔。

9. 将酶标孔【kǒng】置于孔板振【zhèn】动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小时【shí】。

10. 在【zài】吸水纸上【shàng】拍干微【wēi】孔内溶液【yè】，加洗涤液400μL每孔洗3次，每次【cì】需拍干。

11. 后一次【cì】洗涤，清【qīng】空各微孔，在干净的无尘【chén】吸水纸上轻巧【qiǎo】酶标【biāo】板数次，以确保没有洗【xǐ】涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色【sè】底物溶液，于室温静置5~30分【fèn】钟。（显【xiǎn】色【sè】底物A和B需在临【lín】用前15分钟内【nèi】等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪【yí】Blank（空白）孔值，读取450nm处【chù】的【de】光密【mì】度值【zhí】，在570nm至【zhì】590nm之间好有修正，如果酶【méi】标仪不能自【zì】动清除【chú】Blank(空白)孔值，那么手【shǒu】动扣【kòu】除【chú】每个读数的Blank（空白）孔【kǒng】光密度【dù】值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次使用【yòng】试【shì】剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便【biàn】试【shì】剂集中到管【guǎn】底【dǐ】。

2. 每次实【shí】验留【liú】一孔【kǒng】作为空白调零孔，该孔不加任何【hé】试剂，只是zui后【hòu】加【jiā】底物溶【róng】液及2N H2SO4，测量时先用此【cǐ】孔调OD值至零。

3. 为防止【zhǐ】样品蒸发，试验时将反应板放于铺有【yǒu】湿【shī】布的密【mì】闭盒【hé】内，酶标板加上盖或覆膜【mó】。

4. 未使用完的酶标【biāo】板或者【zhě】试剂，请于9-23℃保存【cún】，标准品【pǐn】、生物-素标记抗体工作【zuò】液、辣根过氧【yǎng】化物酶标记【jì】亲和【hé】素工作【zuò】液请依【yī】据所需的量配置使【shǐ】用，请勿重复【fù】使用已稀释过的【de】标准品【pǐn】、生物-素标【biāo】记抗体【tǐ】工作液【yè】或、辣根过氧化物【wù】酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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