大鼠 IL-1 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 IL-1 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用【yòng】前将各种试剂【jì】取出放置【zhì】30分钟，平衡至室温，所有标准品【pǐn】和样品必需设置平行对【duì】照实【shí】验，快速【sù】加入【rù】试【shì】剂至样品中，立即漩【xuán】涡震荡【dàng】2秒混【hún】匀。

1. 依据实【shí】验键盘【pán】纸决【jué】定酶标条的使用量【liàng】，将剩余的酶【méi】标条连【lián】同【tóng】干燥剂一起放回密封塑【sù】料袋【dài】，密封，4℃保存。

2. 移【yí】取50μL中和液至【zhì】各个微孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结【jié】合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结合）孔【kǒng】。

7. 移取50μL 偶联酶至【zhì】各【gè】孔中，除【chú】了TA（全【quán】活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗体工作【zuò】液至各孔中，除了TA（全【quán】活【huó】性）孔、Blank（空白【bái】）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔【kǒng】置于孔板振动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小时【shí】。

10. 在吸水纸上拍干微孔内【nèi】溶液【yè】，加【jiā】洗涤液400μL每孔洗3次【cì】，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清【qīng】空【kōng】各微【wēi】孔【kǒng】，在干【gàn】净的无尘吸水纸【zhǐ】上轻巧酶标板数【shù】次，以确保没【méi】有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色【sè】底物【wù】溶液，于室温静置5~30分钟。（显色底物A和B需在临用前【qián】15分钟内等体积混合，并避光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处【chù】的光密度值，在570nm至590nm之间好【hǎo】有修正【zhèng】，如果酶标【biāo】仪【yí】不能自【zì】动清除Blank(空白)孔值，那么【me】手动扣除每个读【dú】数的【de】Blank（空【kōng】白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次【cì】使用试剂盒时，应将【jiāng】各种【zhǒng】试【shì】剂【jì】管离心数分钟，以便试剂集中【zhōng】到管底【dǐ】。

2. 每次实【shí】验留一孔【kǒng】作为空白【bái】调零孔，该孔不加任何试剂，只是zui后加【jiā】底【dǐ】物溶液及2N H2SO4，测量【liàng】时【shí】先【xiān】用此孔调OD值至零。

3. 为防【fáng】止样品蒸发，试验时将反应板放于铺【pù】有【yǒu】湿布【bù】的密闭盒内，酶标板加上【shàng】盖或覆膜【mó】。

4. 未使用完【wán】的酶标板【bǎn】或【huò】者试剂，请于【yú】9-23℃保存【cún】，标准品、生物-素标【biāo】记抗体【tǐ】工作液、辣根过氧化【huà】物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用，请【qǐng】勿重【chóng】复使【shǐ】用已稀【xī】释过的标准【zhǔn】品、生物【wù】-素【sù】标记【jì】抗体【tǐ】工作液或、辣根过氧化物酶标记亲【qīn】和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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