大鼠 s100b ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 s100b ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应v

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前【qián】将各种【zhǒng】试剂【jì】取出放置30分钟，平衡至室温，所有标准品和样品必需设置平行对照【zhào】实验，快速加【jiā】入试【shì】剂至【zhì】样品中，立即漩涡震荡2秒混【hún】匀【yún】。

1. 依据实验【yàn】键盘【pán】纸决定【dìng】酶【méi】标条的【de】使用量，将剩余的酶标条连同干燥剂一【yī】起放回密封塑料袋，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移【yí】取【qǔ】50μL中和液至各个微孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非【fēi】特异【yì】结合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异【yì】结合）孔【kǒng】。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除【chú】了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体工作液至各孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空【kōng】白）孔和NSB（非特异【yì】结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置于孔【kǒng】板振动【dòng】器上，250~500rpm，室【shì】温孵育2小时。

10. 在吸【xī】水【shuǐ】纸【zhǐ】上拍【pāi】干微孔内溶液，加洗【xǐ】涤液400μL每孔洗3次，每次需拍干。

11. 后【hòu】一【yī】次洗涤，清空各微【wēi】孔，在干净【jìng】的【de】无尘吸【xī】水纸上轻巧【qiǎo】酶标板数次【cì】，以确保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底物溶液，于室温静置5~30分【fèn】钟。（显色底物A和B需在临用前15分【fèn】钟内等体【tǐ】积混合，并避光放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值，读取【qǔ】450nm处的光密【mì】度值，在570nm至590nm之间好有修正，如果酶标仪不能自动清【qīng】除Blank(空白)孔【kǒng】值，那【nà】么手【shǒu】动扣除每【měi】个读数的【de】Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种【zhǒng】试【shì】剂管【guǎn】离心数分【fèn】钟【zhōng】，以便试剂集中到【dào】管底【dǐ】。

2. 每【měi】次实【shí】验留【liú】一孔【kǒng】作为空【kōng】白调零孔，该孔不加任何试剂，只是zui后加底物【wù】溶液【yè】及2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值【zhí】至零。

3. 为防【fáng】止【zhǐ】样品【pǐn】蒸发，试验时将反应板放于铺有湿【shī】布的【de】密闭【bì】盒内，酶标板加上盖或【huò】覆膜。

4. 未使用完的酶标板或【huò】者试【shì】剂，请于9-23℃保存，标准品、生【shēng】物-素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶【méi】标记亲和素【sù】工作【zuò】液请依据【jù】所需的量【liàng】配置使用，请勿重复使用【yòng】已【yǐ】稀释【shì】过的标准【zhǔn】品、生物-素【sù】标记抗体【tǐ】工作液或、辣根过氧【yǎng】化物酶标记亲和素工【gōng】作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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