大鼠 CollagenI 试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 CollagenI 试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取出放置【zhì】30分【fèn】钟，平衡至室温【wēn】，所有标准品【pǐn】和【hé】样【yàng】品必需设置平行对照【zhào】实验【yàn】，快【kuài】速加入试剂至样品中【zhōng】，立即漩【xuán】涡震【zhèn】荡2秒混匀。

1. 依【yī】据实验键【jiàn】盘【pán】纸决定酶标【biāo】条的使用量，将剩余的【de】酶标【biāo】条连同干燥剂一起放回密【mì】封【fēng】塑料袋，密封，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中和液至各个微孔中，除了TA（全活性）孔和【hé】Blank（空【kōng】白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合【hé】）孔【kǒng】。

7. 移取【qǔ】50μL 偶联酶至各孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

8. 移【yí】取50μL 抗体工作液至【zhì】各孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置于孔板【bǎn】振动器上，250~500rpm，室温孵【fū】育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸【zhǐ】上拍干【gàn】微【wēi】孔内溶液，加洗涤液400μL每【měi】孔洗3次【cì】，每次需拍干。

11. 后【hòu】一次洗涤【dí】，清【qīng】空各微【wēi】孔，在【zài】干净的无尘吸水纸上轻巧酶标【biāo】板数次，以确【què】保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底物溶液【yè】，于室温静置5~30分【fèn】钟。（显色底物A和B需【xū】在【zài】临用前【qián】15分【fèn】钟【zhōng】内等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪【yí】Blank（空白）孔值【zhí】，读【dú】取450nm处【chù】的光密度【dù】值，在570nm至590nm之间好【hǎo】有修【xiū】正，如果酶标仪【yí】不能自动清除Blank(空白【bái】)孔值，那么手动扣除每个读【dú】数的Blank（空白）孔【kǒng】光密【mì】度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各【gè】种试剂管【guǎn】离心数【shù】分钟【zhōng】，以【yǐ】便试剂集中【zhōng】到管【guǎn】底。

2. 每次实验留一孔作【zuò】为空【kōng】白调零孔，该孔不加任【rèn】何试剂，只是zui后加【jiā】底物溶【róng】液及2N H2SO4，测量时先用此孔【kǒng】调OD值至【zhì】零。

3. 为防止样品蒸发，试【shì】验时【shí】将反应板放于铺有【yǒu】湿布的密【mì】闭盒【hé】内，酶标板加上盖【gài】或覆膜【mó】。

4. 未使用完【wán】的酶标板或【huò】者试剂，请于9-23℃保【bǎo】存，标准品【pǐn】、生物-素【sù】标记抗【kàng】体工作液、辣【là】根过氧【yǎng】化物【wù】酶标记【jì】亲【qīn】和素【sù】工作【zuò】液请依【yī】据所需的量配置使用，请【qǐng】勿重复使用已稀释过的标【biāo】准品、生物-素标记抗体工作【zuò】液或、辣根过氧【yǎng】化【huà】物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

大鼠 CollagenI 试剂盒（酶联免疫检测法）由上海酶联【lián】生物现货供【gòng】应，包【bāo】括【kuò】CollagenI 试剂盒、酶联免【miǎn】疫检测试【shì】剂盒说明书、实验原理【lǐ】、操作步【bù】骤等产品详细介【jiè】绍。