大鼠 E-cad ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 E-cad ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各【gè】种试剂取出放置30分钟【zhōng】，平衡至室温，所【suǒ】有标【biāo】准品和样品必需设【shè】置平行【háng】对照实验，快速加入试剂【jì】至样【yàng】品中，立即漩涡震荡2秒混【hún】匀。

1. 依据实验键盘纸决定【dìng】酶【méi】标条【tiáo】的【de】使用量【liàng】，将剩余的酶标【biāo】条连同【tóng】干燥剂一起放回密封塑料【liào】袋【dài】，密封，4℃保存。

2. 移【yí】取50μL中和液至各个微孔中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异结合)孔【kǒng】和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特异结合）孔【kǒng】。

7. 移取【qǔ】50μL 偶联酶至各孔中，除【chú】了【le】TA（全活性）孔【kǒng】和【hé】Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔中【zhōng】，除【chú】了TA（全活【huó】性）孔、Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】和NSB（非特异【yì】结【jié】合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔【kǒng】置【zhì】于孔板振动器【qì】上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸【xī】水纸【zhǐ】上拍干微孔【kǒng】内溶液【yè】，加洗涤液400μL每【měi】孔【kǒng】洗3次，每次需拍干。

11. 后一次洗【xǐ】涤，清空各微孔，在干净的【de】无尘吸【xī】水【shuǐ】纸【zhǐ】上轻巧【qiǎo】酶标板数次，以确保没有洗涤【dí】液残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底【dǐ】物溶液，于室温静置5~30分钟【zhōng】。（显色底物A和【hé】B需【xū】在临用前15分钟内【nèi】等【děng】体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密度值【zhí】，在570nm至590nm之间【jiān】好有【yǒu】修正，如果酶标仪【yí】不能自动清【qīng】除Blank(空白)孔值，那么手动【dòng】扣除每个【gè】读【dú】数【shù】的Blank（空白）孔光密度【dù】值【zhí】。

注意事项：

1. 用户【hù】在初次使用【yòng】试剂盒时，应【yīng】将各种试剂管离【lí】心数分钟，以便试剂集【jí】中【zhōng】到管底。

2. 每次实【shí】验【yàn】留一孔作为空白调零【líng】孔，该孔不加任何试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔【kǒng】调【diào】OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试验时将反应【yīng】板放【fàng】于铺有湿布的密闭【bì】盒【hé】内，酶标板加上盖或【huò】覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者【zhě】试剂，请于9-23℃保存【cún】，标准品【pǐn】、生物-素标记【jì】抗体【tǐ】工作液【yè】、辣根过氧化物【wù】酶标记【jì】亲和素工作液请依据所需【xū】的量配置使用，请【qǐng】勿【wù】重复使用已【yǐ】稀释过的【de】标准品【pǐn】、生物-素标记抗【kàng】体【tǐ】工【gōng】作液或、辣根过【guò】氧化物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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