大鼠 CXCR4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 CXCR4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取出【chū】放置30分钟，平衡至室【shì】温【wēn】，所有标【biāo】准品和样品必需设置平行对照【zhào】实验【yàn】，快速加入试剂至样【yàng】品中，立即漩涡【wō】震【zhèn】荡2秒混【hún】匀【yún】。

1. 依【yī】据【jù】实验键盘纸决【jué】定酶标条【tiáo】的使用【yòng】量，将剩余的酶标【biāo】条连同干燥剂一起放回【huí】密封塑【sù】料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至各个微孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结合【hé】）孔。

7. 移取【qǔ】50μL 偶联【lián】酶至各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取【qǔ】50μL 抗【kàng】体工作液至各孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和【hé】NSB（非特异【yì】结合【hé】）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置于孔【kǒng】板振动器【qì】上，250~500rpm，室【shì】温孵育【yù】2小时。

10. 在吸水纸上拍干微孔【kǒng】内溶液，加【jiā】洗【xǐ】涤液400μL每【měi】孔洗3次，每次需拍干【gàn】。

11. 后一次洗涤【dí】，清空各微【wēi】孔，在干净的无尘吸水纸上【shàng】轻巧【qiǎo】酶标板数次，以确【què】保没有洗涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室温静置5~30分钟。（显色底物A和B需在临用前15分钟内【nèi】等【děng】体积【jī】混合，并避【bì】光放置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标【biāo】仪【yí】Blank（空白）孔值【zhí】，读取450nm处的光密度值【zhí】，在570nm至590nm之间好有修正，如果酶标仪不能自动清除Blank(空【kōng】白)孔【kǒng】值【zhí】，那么手动扣【kòu】除每个读【dú】数【shù】的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使【shǐ】用试剂盒【hé】时，应将各种试【shì】剂管离心数分【fèn】钟，以便试剂【jì】集中到管底。

2. 每次实验留【liú】一【yī】孔【kǒng】作为空白调零孔，该【gāi】孔不加任何试【shì】剂，只是zui后加底物溶液及【jí】2N H2SO4，测量时先用此孔调【diào】OD值【zhí】至零。

3. 为【wéi】防【fáng】止样品蒸发，试验时将反应【yīng】板【bǎn】放于铺有湿布的密【mì】闭盒内，酶【méi】标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于9-23℃保【bǎo】存，标准品、生物-素标【biāo】记【jì】抗体工作液、辣根【gēn】过【guò】氧化【huà】物酶【méi】标记亲和素工作液请依据所【suǒ】需的量配置【zhì】使用，请勿重复使用已稀释过的【de】标准【zhǔn】品【pǐn】、生物-素标记抗体工作液或、辣根【gēn】过氧化物酶标记亲【qīn】和素工【gōng】作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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