大鼠 Chemerin 试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 Chemerin 试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将【jiāng】各【gè】种试【shì】剂【jì】取出放【fàng】置30分钟【zhōng】，平衡至室【shì】温，所有标准品和样【yàng】品必需设置平行【háng】对照实验，快速加入试剂至样【yàng】品中【zhōng】，立【lì】即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决定酶标条的【de】使用量，将剩余的酶【méi】标条【tiáo】连同干【gàn】燥【zào】剂一起放回密封塑料袋，密封【fēng】，4℃保存。

2. 移取50μL中和液【yè】至【zhì】各个微孔中【zhōng】，除了【le】TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结合【hé】)孔和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶【ǒu】联酶至【zhì】各【gè】孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

8. 移取50μL 抗体【tǐ】工作液至各孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白【bái】）孔和NSB（非特异结合【hé】）孔【kǒng】。

9. 将酶标孔置【zhì】于孔板振【zhèn】动器上，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时。

10. 在吸【xī】水纸上拍干微孔内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每【měi】孔洗3次【cì】，每次【cì】需拍干。

11. 后一次【cì】洗【xǐ】涤【dí】，清空各微【wēi】孔，在干净的无尘吸水【shuǐ】纸上轻【qīng】巧酶标板数次，以确保【bǎo】没【méi】有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔【kǒng】200μL显【xiǎn】色底物溶液，于室【shì】温静置5~30分钟。（显色底物【wù】A和B需在临用前15分【fèn】钟内等体积【jī】混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标仪Blank（空白）孔值【zhí】，读取450nm处【chù】的【de】光密度值，在570nm至590nm之间好有修【xiū】正【zhèng】，如果酶标仪不能自动清除Blank(空白【bái】)孔【kǒng】值，那么【me】手动扣除每【měi】个读数【shù】的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使【shǐ】用试【shì】剂盒时，应将【jiāng】各种试剂【jì】管离心数分钟【zhōng】，以便试剂集中到管底【dǐ】。

2. 每次实【shí】验留【liú】一孔作为空白调零【líng】孔【kǒng】，该孔不加任何【hé】试剂，只是zui后【hòu】加底物溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔【kǒng】调OD值至零。

3. 为防止样品蒸【zhēng】发，试验【yàn】时将【jiāng】反应板放于铺有湿布的密【mì】闭盒内【nèi】，酶标板加【jiā】上盖或覆膜。

4. 未【wèi】使用完的酶【méi】标板或者试剂，请【qǐng】于9-23℃保存【cún】，标准品、生物-素标【biāo】记【jì】抗体工作液、辣【là】根过氧化物酶【méi】标记【jì】亲和【hé】素工作液请依据所需的量配置使用，请勿重复使用已稀释【shì】过的标【biāo】准品、生物【wù】-素标记抗体工作液或、辣根过【guò】氧化物【wù】酶标记亲【qīn】和素工【gōng】作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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