大鼠 CD4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 CD4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂【jì】取出放置【zhì】30分钟【zhōng】，平衡至室温，所有标【biāo】准品和样品【pǐn】必需设【shè】置平行对照实验，快速加【jiā】入试剂至【zhì】样品中，立【lì】即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验【yàn】键盘纸【zhǐ】决定酶标条的使用【yòng】量【liàng】，将剩【shèng】余的酶【méi】标条连同【tóng】干燥剂一起放回密封塑【sù】料【liào】袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个微孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔【kǒng】。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结【jié】合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特【tè】异【yì】结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和【hé】Blank（空白）孔。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体工作液至各孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔【kǒng】、Blank（空白）孔和【hé】NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置【zhì】于【yú】孔板振动器上【shàng】，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小时。

10. 在【zài】吸水纸上拍干微孔【kǒng】内溶【róng】液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每次【cì】需【xū】拍干。

11. 后一【yī】次【cì】洗【xǐ】涤，清【qīng】空各微孔【kǒng】，在干净的无尘吸【xī】水纸上【shàng】轻巧酶标板数次，以确保没有洗涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔【kǒng】200μL显色底物溶【róng】液，于室温静置5~30分钟【zhōng】。（显色底物A和B需在临【lín】用前15分钟内等体积混合，并避光【guāng】放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密【mì】度值，在570nm至590nm之间好有【yǒu】修正，如果酶标仪【yí】不能【néng】自动清除Blank(空白)孔值，那么【me】手动扣除每个【gè】读【dú】数的Blank（空白【bái】）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户【hù】在初次【cì】使【shǐ】用试剂盒时，应将各【gè】种试剂管【guǎn】离心数分钟【zhōng】，以便【biàn】试剂集中到管底。

2. 每次实验【yàn】留一【yī】孔【kǒng】作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只【zhī】是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量【liàng】时【shí】先用此【cǐ】孔调OD值【zhí】至零【líng】。

3. 为【wéi】防止样品【pǐn】蒸发【fā】，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内【nèi】，酶【méi】标【biāo】板加上盖或覆膜。

4. 未使【shǐ】用完的酶【méi】标【biāo】板【bǎn】或者试剂，请于9-23℃保存，标准品【pǐn】、生物-素标记【jì】抗体工作液【yè】、辣根过氧化物【wù】酶标记【jì】亲【qīn】和素工作液请依【yī】据所需的量【liàng】配置使用，请勿重【chóng】复使【shǐ】用已稀释过的标准品、生【shēng】物-素标【biāo】记抗体工作液或、辣根过氧化物酶【méi】标记亲和素【sù】工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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