大鼠 6ketoPGFLa 试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 6ketoPGFLa 试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用【yòng】前【qián】将各种试剂取出放置30分钟，平衡至室温，所有标【biāo】准品和【hé】样品必需设置平行对照【zhào】实验【yàn】，快速加入试剂至样品中，立即【jí】漩涡【wō】震【zhèn】荡2秒混【hún】匀。

1. 依据实【shí】验键盘纸【zhǐ】决定【dìng】酶标【biāo】条的使用量，将剩余的酶标条【tiáo】连【lián】同干燥剂一起放回密封【fēng】塑料袋，密封【fēng】，4℃保存。

2. 移取【qǔ】50μL中【zhōng】和液至各个微【wēi】孔中，除了TA（全活性）孔和【hé】Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔【kǒng】和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔【kǒng】。

7. 移取【qǔ】50μL 偶联酶【méi】至各孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取【qǔ】50μL 抗【kàng】体工作液至各孔中，除【chú】了TA（全【quán】活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非【fēi】特异【yì】结合）孔。

9. 将【jiāng】酶标孔置于孔板【bǎn】振动器【qì】上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小时。

10. 在【zài】吸水纸上拍【pāi】干微孔内溶【róng】液，加洗涤液400μL每【měi】孔洗3次，每【měi】次需拍干。

11. 后一次洗【xǐ】涤，清空各微【wēi】孔，在干净【jìng】的无【wú】尘吸水纸【zhǐ】上轻巧酶标板【bǎn】数次，以确保没有洗【xǐ】涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底【dǐ】物溶液【yè】，于【yú】室温【wēn】静置5~30分钟。（显色底物【wù】A和B需【xū】在【zài】临用前15分钟内等体积混合，并避光放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标【biāo】仪Blank（空白）孔值，读【dú】取450nm处的光【guāng】密度值，在570nm至590nm之间【jiān】好有修正，如果酶标仪【yí】不能自【zì】动【dòng】清【qīng】除Blank(空白)孔【kǒng】值，那么手动扣除每个读数的Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】光密【mì】度【dù】值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂【jì】盒时，应将【jiāng】各种试剂【jì】管【guǎn】离心数分钟，以便试剂集中到管底【dǐ】。

2. 每次【cì】实验留一孔作为空白调零孔，该【gāi】孔不加任【rèn】何试【shì】剂，只是zui后【hòu】加底物溶液【yè】及【jí】2N H2SO4，测【cè】量时先用此孔【kǒng】调OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试验时【shí】将反【fǎn】应板放于【yú】铺有湿布的密【mì】闭盒【hé】内，酶标板【bǎn】加上盖或覆膜。

4. 未【wèi】使用【yòng】完的【de】酶标板或者试剂，请于9-24℃保存，标准品【pǐn】、生物-素标记抗【kàng】体工作液、辣根过氧【yǎng】化【huà】物酶标记【jì】亲和素工作液【yè】请依据所需的量配置使用，请【qǐng】勿重【chóng】复使用已稀释【shì】过的标【biāo】准品、生物-素标记抗体工作液【yè】或、辣【là】根过氧化物酶标记【jì】亲和素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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