大鼠6KetoPGF1α试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠6KetoPGF1α试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂【jì】取出【chū】放【fàng】置30分钟，平衡至室温【wēn】，所有【yǒu】标准品和【hé】样品【pǐn】必需设置平行对【duì】照实验，快速加入试剂【jì】至样品中，立即漩涡【wō】震荡2秒混匀。

1. 依据实验键【jiàn】盘纸决定酶标条【tiáo】的【de】使用量，将剩余的酶标【biāo】条连【lián】同干燥剂一起【qǐ】放回【huí】密封塑料袋，密封，4℃保存【cún】。

2. 移【yí】取50μL中和液至各个微孔中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非【fēi】特【tè】异结合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异【yì】结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各【gè】孔中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

8. 移取50μL 抗体【tǐ】工【gōng】作液至各孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结【jié】合）孔。

9. 将酶标孔置于孔板振动【dòng】器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸【xī】水纸上拍干微孔内溶【róng】液，加洗涤【dí】液400μL每孔【kǒng】洗【xǐ】3次，每次需拍干。

11. 后一次洗【xǐ】涤，清空各微孔，在干净【jìng】的无尘吸水纸上轻巧酶标板数次，以确【què】保没【méi】有洗【xǐ】涤液残【cán】留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于【yú】室温【wēn】静置【zhì】5~30分钟。（显【xiǎn】色底物A和【hé】B需在临【lín】用前15分钟【zhōng】内等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标【biāo】仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密度值，在570nm至【zhì】590nm之间好有修正，如果酶标仪【yí】不【bú】能自动清除Blank(空【kōng】白)孔值【zhí】，那么手动扣除【chú】每个读数的Blank（空【kōng】白）孔光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数【shù】分【fèn】钟【zhōng】，以便【biàn】试剂集中到管底【dǐ】。

2. 每次实验留一【yī】孔作【zuò】为空【kōng】白调零【líng】孔【kǒng】，该【gāi】孔不【bú】加任何试剂，只是zui后加底物溶【róng】液及2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值至零。

3. 为防止样品蒸发【fā】，试【shì】验时将反应板放于铺【pù】有湿布【bù】的密闭【bì】盒内，酶标板加上【shàng】盖或覆膜。

4. 未使用完【wán】的酶【méi】标板或者试【shì】剂，请于9-24℃保存，标准品【pǐn】、生物【wù】-素标记抗体工【gōng】作液、辣根过【guò】氧化物【wù】酶标记亲和素工作【zuò】液【yè】请依据所需的量配置使用，请勿【wù】重复使用已【yǐ】稀释【shì】过的标准品、生【shēng】物-素标记抗【kàng】体【tǐ】工【gōng】作液或【huò】、辣根过氧化物【wù】酶【méi】标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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