大鼠 G6PD ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：产品名称

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前【qián】将各种试剂取出放【fàng】置【zhì】30分钟，平衡至【zhì】室温，所有标准【zhǔn】品【pǐn】和样品【pǐn】必需【xū】设置平行对照实【shí】验【yàn】，快速加入试剂至样品中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决【jué】定酶【méi】标条的使用【yòng】量，将剩余的酶标条连同干燥剂一【yī】起放回密封塑【sù】料袋【dài】，密封，4℃保【bǎo】存【cún】。

2. 移取50μL中【zhōng】和【hé】液至【zhì】各个微孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结【jié】合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联【lián】酶至各孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔【kǒng】。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体工作液至各孔中【zhōng】，除了【le】TA（全活【huó】性【xìng】）孔【kǒng】、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合【hé】）孔。

9. 将酶标孔置【zhì】于孔板振【zhèn】动器上，250~500rpm，室温孵【fū】育【yù】2小【xiǎo】时。

10. 在吸水【shuǐ】纸上【shàng】拍【pāi】干【gàn】微孔内溶液，加洗涤【dí】液400μL每孔洗3次，每次需拍干。

11. 后一次【cì】洗涤，清空各微孔【kǒng】，在干【gàn】净的无尘吸水纸上轻巧酶标【biāo】板数次【cì】，以确【què】保没有洗【xǐ】涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底【dǐ】物溶液【yè】，于室温静置5~30分钟。（显色【sè】底【dǐ】物A和B需在【zài】临用前【qián】15分【fèn】钟内等体积混合，并避光放置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值【zhí】，读取450nm处【chù】的光密度【dù】值，在570nm至590nm之间好有修正，如果【guǒ】酶标仪不能自【zì】动清除Blank(空白)孔【kǒng】值【zhí】，那么手【shǒu】动扣除每个读数的Blank（空白）孔光密度【dù】值。

注意事项：

1. 用户在初【chū】次使用试剂盒【hé】时，应将各种试剂管离【lí】心【xīn】数分【fèn】钟，以便试剂【jì】集中到【dào】管底。

2. 每次实【shí】验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任【rèn】何试【shì】剂，只【zhī】是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时先【xiān】用此孔【kǒng】调【diào】OD值至零【líng】。

3. 为防止【zhǐ】样品蒸发，试验【yàn】时将反应板放于铺【pù】有湿布【bù】的密闭盒内，酶标板加上盖【gài】或【huò】覆膜。

4. 未使用完的【de】酶标板或者【zhě】试剂，请于9-24℃保存，标准品、生物-素标【biāo】记抗【kàng】体【tǐ】工【gōng】作液、辣根【gēn】过氧化物酶标记亲【qīn】和素工【gōng】作液请依据所需的【de】量配置使用，请勿重复使用已稀释过【guò】的标【biāo】准品【pǐn】、生【shēng】物-素标记【jì】抗【kàng】体【tǐ】工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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