大鼠6KetoPGF1α 试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠6KetoPGF1α 试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取出放置30分【fèn】钟，平衡【héng】至【zhì】室温，所有标准品和样品必需设置【zhì】平【píng】行对照实验【yàn】，快【kuài】速加【jiā】入试剂【jì】至样品中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据【jù】实验【yàn】键盘【pán】纸决定酶【méi】标条的【de】使用量，将剩余【yú】的酶标条【tiáo】连同【tóng】干【gàn】燥剂一起放回密封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至【zhì】各【gè】个微孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结【jié】合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结【jié】合）孔。

7. 移取50μL 偶【ǒu】联酶至各孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各【gè】孔【kǒng】中，除了【le】TA（全活性）孔、Blank（空白【bái】）孔和NSB（非特异结合【hé】）孔。

9. 将酶【méi】标孔【kǒng】置于孔板振【zhèn】动器上，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸上拍干微孔【kǒng】内【nèi】溶【róng】液，加洗【xǐ】涤液400μL每孔洗3次，每【měi】次需拍干。

11. 后一【yī】次洗涤，清空各微孔【kǒng】，在干净的无尘吸水【shuǐ】纸【zhǐ】上【shàng】轻巧酶标板数次【cì】，以确【què】保【bǎo】没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色底物溶【róng】液，于室温静置【zhì】5~30分钟。（显色【sè】底【dǐ】物A和【hé】B需在临用前15分钟【zhōng】内等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标仪Blank（空【kōng】白）孔值，读取450nm处的光密度值【zhí】，在570nm至590nm之间好【hǎo】有修正【zhèng】，如果酶标仪不能自动清除Blank(空白)孔值，那么【me】手动扣【kòu】除【chú】每个读数【shù】的Blank（空白【bái】）孔【kǒng】光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时，应【yīng】将各种试剂管【guǎn】离心【xīn】数分【fèn】钟，以便【biàn】试剂【jì】集中到管底。

2. 每次实验【yàn】留一孔【kǒng】作为空白【bái】调【diào】零孔，该孔不加任何试【shì】剂，只是zui后加底物溶液及【jí】2N H2SO4，测量【liàng】时先用【yòng】此孔调OD值至零【líng】。

3. 为【wéi】防【fáng】止样品【pǐn】蒸发，试验【yàn】时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶【méi】标板加上【shàng】盖或覆膜【mó】。

4. 未使用完的酶标板或者试剂【jì】，请于9-22℃保存，标【biāo】准品、生【shēng】物-素标记抗体工作液、辣【là】根过氧化物酶标记【jì】亲和素工作液请依据所需的量配置【zhì】使用，请勿重复【fù】使用已稀释【shì】过【guò】的标准品【pǐn】、生物-素标记抗体【tǐ】工作液或、辣根【gēn】过氧【yǎng】化物【wù】酶标【biāo】记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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