大鼠 5HT2A ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 5HT2A ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用【yòng】前将各种试【shì】剂取【qǔ】出放置30分钟，平衡至室温，所有【yǒu】标准品【pǐn】和样品【pǐn】必需设置平行对照实验，快速加入试剂至【zhì】样品中【zhōng】，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决定【dìng】酶标条【tiáo】的使【shǐ】用量，将剩余的酶标条连同干燥剂【jì】一起放回【huí】密【mì】封【fēng】塑料袋，密封【fēng】，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个微【wēi】孔中，除了TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结合)孔【kǒng】和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除【chú】了TA（全【quán】活性）孔和【hé】Blank（空【kōng】白）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗【kàng】体工作液至【zhì】各孔中【zhōng】，除了【le】TA（全活【huó】性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异【yì】结合）孔。

9. 将酶标孔置于【yú】孔板振动器上【shàng】，250~500rpm，室【shì】温孵育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸上拍干微孔【kǒng】内溶液，加洗【xǐ】涤液400μL每【měi】孔洗3次，每次【cì】需拍【pāi】干。

11. 后【hòu】一【yī】次洗涤【dí】，清【qīng】空各【gè】微孔，在干净的无尘吸水纸【zhǐ】上轻巧酶标板数次，以确保没有洗涤液【yè】残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色底物溶液【yè】，于【yú】室温静【jìng】置5~30分【fèn】钟。（显色底物A和【hé】B需在临【lín】用前15分钟内等体积混【hún】合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪【yí】Blank（空【kōng】白）孔值【zhí】，读取450nm处的光密度值【zhí】，在570nm至590nm之间好有修正，如果酶【méi】标仪不能自【zì】动清【qīng】除【chú】Blank(空白【bái】)孔值【zhí】，那么手动扣除每个读【dú】数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初【chū】次使用试剂盒时，应【yīng】将各种试剂管离心数【shù】分【fèn】钟，以便试剂集中到【dào】管底。

2. 每次实【shí】验留【liú】一孔作为空白调零孔【kǒng】，该孔不加任何试【shì】剂，只是zui后加底物【wù】溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔【kǒng】调OD值【zhí】至零【líng】。

3. 为防止样品蒸发【fā】，试【shì】验时将反应板放于铺有湿布的密【mì】闭盒【hé】内，酶标板加上盖【gài】或覆【fù】膜。

4. 未使【shǐ】用完的酶标板或者【zhě】试【shì】剂，请于9-24℃保存，标准【zhǔn】品、生物-素标记抗体工作液、辣根过【guò】氧化物酶标【biāo】记亲【qīn】和【hé】素工作【zuò】液【yè】请依据所【suǒ】需的量配置使用，请勿重复使用已稀释过的标【biāo】准品、生物-素标记抗【kàng】体工作液【yè】或、辣根过氧化物【wù】酶标【biāo】记亲【qīn】和素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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