大鼠 5HT1A ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 5HT1A ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将各种试剂取【qǔ】出放置【zhì】30分钟，平【píng】衡至室温【wēn】，所有标准品和【hé】样品【pǐn】必需设置平行对照实【shí】验，快速加入试剂至样品中，立即漩【xuán】涡震【zhèn】荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸【zhǐ】决定酶【méi】标条【tiáo】的使【shǐ】用量，将剩余的酶标【biāo】条连同干燥剂【jì】一【yī】起放回密封塑料袋，密【mì】封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液【yè】至【zhì】各个微孔【kǒng】中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非【fēi】特异结合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合【hé】）孔。

7. 移取50μL 偶联【lián】酶至各孔【kǒng】中【zhōng】，除【chú】了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

8. 移取50μL 抗体工作【zuò】液至各孔中，除了【le】TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特【tè】异结【jié】合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置【zhì】于孔【kǒng】板振动【dòng】器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸上【shàng】拍干微孔内【nèi】溶液【yè】，加【jiā】洗涤液【yè】400μL每孔洗3次，每次需拍干。

11. 后一【yī】次【cì】洗【xǐ】涤，清空各微孔，在干净的无尘吸水纸上轻巧【qiǎo】酶标板数次，以确保没【méi】有洗涤液残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底物溶液，于室温静置【zhì】5~30分钟。（显色底物A和B需在临用前15分【fèn】钟内【nèi】等体积混合，并避光放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处【chù】的光【guāng】密度值，在570nm至590nm之间【jiān】好有修【xiū】正，如果酶【méi】标仪不能自动清除Blank(空【kōng】白)孔值【zhí】，那么手动扣除每个读数的Blank（空白）孔光密度【dù】值。

注意事项：

1. 用户【hù】在初次使【shǐ】用试【shì】剂盒时，应将各【gè】种试剂【jì】管离心【xīn】数分钟，以便试剂集中到管底。

2. 每次实验留一孔作为【wéi】空白调【diào】零孔，该孔【kǒng】不加任何试剂，只是【shì】zui后【hòu】加底物溶液【yè】及2N H2SO4，测量时先用此【cǐ】孔调OD值至零【líng】。

3. 为防止样品蒸发，试【shì】验【yàn】时【shí】将反应板【bǎn】放于铺有湿布的密闭【bì】盒内，酶标【biāo】板加上盖或覆膜。

4. 未使【shǐ】用完的酶标板【bǎn】或者试剂，请于9-24℃保存，标【biāo】准品、生物-素标记抗体工作液、辣根过氧化物【wù】酶标【biāo】记亲和素工作液请依【yī】据所需的量配置使【shǐ】用【yòng】，请勿重【chóng】复使用已稀释过的【de】标准【zhǔn】品【pǐn】、生物-素标【biāo】记抗体工作【zuò】液【yè】或、辣根过氧化物【wù】酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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