大鼠 5HT ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 5HT ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将【jiāng】各种试【shì】剂取出【chū】放置30分钟【zhōng】，平【píng】衡至室温，所有标准【zhǔn】品和【hé】样品【pǐn】必需设置平行【háng】对照【zhào】实验，快速加入试剂至【zhì】样品中，立即漩涡震【zhèn】荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决定酶标条的使用量，将剩余的酶标条连同干燥【zào】剂一起【qǐ】放回【huí】密封【fēng】塑料【liào】袋，密封【fēng】，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中和液至各个微孔中，除了TA（全活【huó】性）孔和【hé】Blank（空白【bái】）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结【jié】合)孔和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合【hé】）孔。

7. 移取【qǔ】50μL 偶【ǒu】联酶至各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】。

8. 移取50μL 抗体【tǐ】工作液【yè】至各孔中，除了【le】TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和【hé】NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置【zhì】于【yú】孔板振动器上，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时。

10. 在吸【xī】水纸上拍干微孔内溶液，加洗【xǐ】涤液400μL每【měi】孔洗【xǐ】3次，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清【qīng】空各微【wēi】孔【kǒng】，在干净的【de】无尘吸【xī】水【shuǐ】纸【zhǐ】上轻巧酶标板数次，以确保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室【shì】温【wēn】静置5~30分钟【zhōng】。（显色【sè】底物A和B需在临用前15分钟内【nèi】等体积混合【hé】，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标【biāo】仪Blank（空白）孔值【zhí】，读取450nm处【chù】的光密度值，在570nm至590nm之【zhī】间【jiān】好【hǎo】有修正【zhèng】，如果酶标仪不能自动清除【chú】Blank(空白)孔值，那么手动扣除每【měi】个【gè】读数的Blank（空白）孔【kǒng】光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时【shí】，应【yīng】将【jiāng】各种试剂管离心数分钟，以【yǐ】便试剂集【jí】中到管底。

2. 每次实验留【liú】一孔作为空白调零【líng】孔，该【gāi】孔不加【jiā】任何试剂【jì】，只是zui后加底【dǐ】物溶液及2N H2SO4，测量时【shí】先用此孔【kǒng】调【diào】OD值至零。

3. 为防止样品【pǐn】蒸发，试验时将反应【yīng】板放于铺【pù】有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖【gài】或覆膜【mó】。

4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于【yú】9-24℃保存，标准品、生物【wù】-素【sù】标记抗体工【gōng】作液、辣根过【guò】氧化【huà】物酶【méi】标记亲和素工作液请依据所需的【de】量配置使用，请【qǐng】勿重复使用已稀【xī】释过的标准品、生【shēng】物-素【sù】标记抗体工作液【yè】或【huò】、辣根过氧化物酶标记【jì】亲和素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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