大鼠 MHPG ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 MHPG ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将【jiāng】各【gè】种试【shì】剂取出放置30分【fèn】钟，平衡至【zhì】室温，所有标【biāo】准品和样品必需设置平行对【duì】照实验，快速加【jiā】入试剂至样【yàng】品中，立即漩【xuán】涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键【jiàn】盘纸决定酶标条的使用量【liàng】，将剩余的酶标条连同干燥剂【jì】一起【qǐ】放【fàng】回密封塑料袋，密封，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中和液至【zhì】各【gè】个微孔中【zhōng】，除了TA（全活【huó】性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异【yì】结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非【fēi】特异结合【hé】）孔。

7. 移取50μL 偶联酶【méi】至各孔中，除【chú】了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至【zhì】各孔中，除了TA（全【quán】活【huó】性）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非特【tè】异【yì】结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔【kǒng】置于孔板振动器上，250~500rpm，室温孵【fū】育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸【zhǐ】上拍干微【wēi】孔内溶液，加洗涤【dí】液400μL每孔【kǒng】洗3次，每【měi】次需拍干。

11. 后【hòu】一次【cì】洗涤，清【qīng】空各微孔，在干净的无尘吸水纸上轻巧酶标板数次【cì】，以确【què】保没【méi】有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色【sè】底物【wù】溶【róng】液，于室温静置5~30分钟。（显色底物A和B需在【zài】临用前【qián】15分钟内等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标【biāo】仪【yí】Blank（空白）孔【kǒng】值，读取450nm处的光密度【dù】值【zhí】，在570nm至590nm之间【jiān】好有修正，如果酶标仪不能【néng】自动清除【chú】Blank(空【kōng】白)孔值，那么手动扣除每个读数的【de】Blank（空白）孔光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用户在初次【cì】使用试剂盒时，应将各种试剂管【guǎn】离【lí】心数【shù】分【fèn】钟，以便试【shì】剂集中【zhōng】到管底。

2. 每【měi】次【cì】实验留一孔【kǒng】作为空白调零孔，该孔【kǒng】不加任何试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值【zhí】至零。

3. 为防止【zhǐ】样【yàng】品蒸【zhēng】发，试验时【shí】将反应板放于【yú】铺有湿布的密闭盒内，酶【méi】标板加【jiā】上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者【zhě】试【shì】剂，请于9-24℃保存，标【biāo】准品、生物-素标【biāo】记抗【kàng】体工作液、辣根过氧化【huà】物酶标【biāo】记亲和素工作液请依据所需的量配【pèi】置使【shǐ】用，请【qǐng】勿重复使用已稀释过的标准品、生物-素【sù】标记抗【kàng】体工作液【yè】或【huò】、辣根过氧化物【wù】酶标记亲和【hé】素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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