人肾细胞腺癌细胞（ACHN）

人肾细胞腺癌细胞(ACHN)
细胞介绍：
人干【gàn】扰素可抑【yì】制其生长。ACHN或能【néng】用于人干扰【rǎo】素、干扰素诱导因【yīn】子的抗肿瘤活性研究【jiū】。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 MEM 培养基(MEM, GIBCO，添加 NaHC031.5g八，丙酮【tóng】酸钠O.llg八),90%;胎牛【niú】血清，10%。
2.培养条件：气相：空气【qì】，95%;二氧化碳【tàn】，5%。温度：37摄氏【shì】度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液氮【dàn】储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管【guǎn】在37°C水【shuǐ】浴中迅【xùn】速摇晃解冻【dòng】，加入4mL培【péi】养【yǎng】基【jī】混合均匀。在1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培【péi】养【yǎng】基后吹匀。然后将所【suǒ】有细【xì】胞悬液加入培养瓶【píng】中培养过夜（或将细胞悬【xuán】液加入【rù】l〇cm皿中【zhōng】，加入约8ml培养基【jī】，培养过夜）。第二天【tiān】换液并检【jiǎn】查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人肾细胞腺癌细胞(ACHN)对于贴壁细胞，传【chuán】代可参考以【yǐ】下方【fāng】法：弃去【qù】培养上清，用不含【hán】钙、镁离子的PBS润洗细胞【bāo】9-21次。力口【kǒu】 2m丨【shù】消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中，置于【yú】37°C培养箱中消化【huà】9-21分钟，然后在显微镜【jìng】下观察细胞消化情况【kuàng】，若细胞【bāo】大部分变圆并脱落，迅速【sù】拿回操【cāo】作台，轻敲几下培养瓶【píng】后加少【shǎo】量培养基【jī】终【zhōng】止消化。按6-8ml/瓶补加培养【yǎng】基【jī】，轻轻打【dǎ】匀后吸出，在1000RPM条件【jiàn】下离心4分 钟，弃去【qù】上【shàng】清【qīng】液，补【bǔ】加l-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液【yè】按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到新的含8ml培养基的新【xīn】皿中。
 
细胞冻【dòng】存【cún】：待细胞生长状态良好时，可进【jìn】行细【xì】胞冻【dòng】存。贴壁细【xì】胞【bāo】冻存【cún】时，弃去培养基后加入少【shǎo】量胰酶，细【xì】胞【bāo】变圆脱落后，加入约【yuē】lml含血清的培养【yǎng】基后加入冻存管中，再添不【bú】l〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项：
收到细【xì】胞后，若发现干冰己挥发干净、冻存【cún】管【guǎn】瓶【píng】盖脱【tuō】落、破损及细胞有污【wū】染【rǎn】，请立即与【yǔ】我们电联。所有动物细胞【bāo】均【jun1】视为有【yǒu】潜在的生物危【wēi】害性，必须在二级生物安全台【tái】内操【cāo】作，并请注意防【fáng】护，所有【yǒu】废液及接【jiē】触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃【qì】瓶中。
 
细胞特性：
1)来源：肾细胞腺癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人肾细胞腺癌细胞(ACHN)运输【shū】和保存：使用含有胎牛【niú】血清【qīng】的2ml冻存【cún】管发送存活细【xì】胞。收到细【xì】胞后，可在1000RPM，常温条件【jiàn】下，离心5min后，于【yú】洁【jié】净操作台弃去上清，加入推【tuī】荐【jiàn】使用的培养基后转【zhuǎn】移至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中培养，传代达到细胞生长状态良好【hǎo】时，再进行冻存【cún】。具体操作见细【xì】胞培养步【bù】骤。
细胞用途：仅供使用。