大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（低分化）PC-12

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（低分化）PC-12
细胞介绍：
该【gāi】细【xì】胞【bāo】系来自能移植的雄性【xìng】大【dà】鼠【shǔ】肾上腺嗜铬细胞瘤。这些细胞表达神经【jīng】生长【zhǎng】因子(NGF)受体。NGF可【kě】诱导产生神【shén】经表【biǎo】型。这些细胞不合成肾上腺素。
  
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO)，85%;马【mǎ】血【xuè】清【qīng】 10%胎牛血清5%。
2.培养条件：气相【xiàng】：空气，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度【dù】：37摄氏度，培养箱湿【shī】度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养【yǎng】基，10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含有lmL细胞【bāo】悬液的冻存管在【zài】37°C水浴中迅速摇晃解冻，入4mL培养【yǎng】基混合均匀【yún】。在1000RPM条件下【xià】离心【xīn】4分【fèn】钟【zhōng】，弃去上清液，补加l-2mL培养基【jī】后吹匀。然后将所有细胞悬【xuán】液加入培养【yǎng】瓶中培【péi】养【yǎng】过【guò】夜（或将细【xì】胞悬液加入l〇cm皿中【zhōng】，加入约8ml培养基【jī】，培【péi】养过夜）。第二天换【huàn】液并检
查细胞密度。
细胞传代：如【rú】果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培【péi】养。对于贴壁细胞【bāo】，传代可参考以下方【fāng】法：弃去培养上清【qīng】，用不含钙、镁离【lí】子【zǐ】的【de】PBS润洗细【xì】胞9-21次【cì】。力口2m丨消【xiāo】化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中【zhōng】，置于37°C培养箱中【zhōng】消化9-21分钟，然【rán】后在显微镜【jìng】下观察细胞消【xiāo】化【huà】情况，若细胞大部分【fèn】变圆并脱【tuō】落，迅【xùn】速拿回操作台，轻敲几下培养瓶【píng】后加少量培养基终止消化【huà】。
按【àn】6-8ml/瓶补加培养基【jī】，轻轻打匀后吸【xī】出，在1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下离心4分弃【qì】去上清【qīng】液，补加l-2mL培养液后吹匀【yún】。
将【jiāng】细胞【bāo】悬液按1: 2到1: 5的比例【lì】分到新【xīn】的【de】含8ml培养基的新皿中或者瓶中。细【xì】胞冻存：待细胞生长状【zhuàng】态良【liáng】好时，可进行细【xì】胞冻存。贴【tiē】壁细胞冻【dòng】存时，弃去培养【yǎng】基后加入少量胰【yí】酶，细胞变圆脱落后，加入约lml含血清的【de】培【péi】养基【jī】后
加入冻存管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存。
  
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（低分化）PC-12注意事项：
收到细【xì】胞后，若发现干冰己挥【huī】发干净、冻存管【guǎn】瓶盖脱落、破【pò】损及细胞【bāo】有污染，请即与【yǔ】我【wǒ】们【men】电联。
所有【yǒu】动物细胞均【jun1】视为有潜在的生物危【wēi】害性【xìng】，必【bì】须【xū】在二级生物安全台内操作，并请注【zhù】意【yì】防护，所有废液及接触【chù】过此【cǐ】细胞的【de】器皿需要【yào】灭菌后方能丢弃。
  
细胞特性：
1)来源：肾上腺嗜铬细胞瘤
2)形态：多角形
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（低分化）PC-12运输【shū】和保存【cún】：使【shǐ】用含有胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收【shōu】到细【xì】胞后，可【kě】在1000RPM，常温条件下【xià】，离心5min后，于洁净操【cāo】作台弃去上清，加入推荐使用【yòng】的培养基后转移【yí】至l〇cm培养皿【mǐn】或【huò】者T25培养瓶中培养【yǎng】，传代达到细胞【bāo】生长【zhǎng】状态【tài】良好时，再进【jìn】行冻存【cún】。具体【tǐ】操作见细【xì】胞培养步骤。细胞用途：仅供使用。