ELISA是酶【méi】联【lián】接免疫【yì】吸附剂测【cè】定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的【de】简称。它是继免疫荧光和放射【shè】免疫技术之后发展起来的一【yī】种免疫酶技术。此项【xiàng】技术自70年代初问世以来【lái】，发【fā】展【zhǎn】十分【fèn】迅速，目前已被广泛用于生物【wù】学和医学【xué】科学的【de】许多【duō】领域。ELISA免疫测定【dìng】,您真的掌【zhǎng】握透彻【chè】了吗?不要着急，接着往【wǎng】下看！

ELISA免疫测定目的是？
1.测定体液中【zhōng】的【de】各【gè】种蛋【dàn】白质，包括含量极少的蛋【dàn】白质如甲胎蛋白等；
2.测定激素，包括小分子量的甾体激素等；
3.测定抗生素和药物；
4.测定病原体抗原，HBsAg、HBeAg等；
5.利用纯化的抗原检测标本中的抗体，例如抗-HBs等；

ELISA免疫测定原理：
①使抗原（或抗体）结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性；
②使抗原（或抗体【tǐ】）与【yǔ】某种酶【méi】联结成酶标 抗原（或抗体），而且此【cǐ】酶标抗【kàng】原（或抗【kàng】体）既保留【liú】其免疫活性，又保留【liú】其【qí】酶活性；
③测定时将【jiāng】受【shòu】检标本【běn】（抗体【tǐ】或抗原）和【hé】酶标抗原（或 抗体）按【àn】不同步骤与固相【xiàng】载体表面的抗原或抗体进【jìn】行反应，再用洗涤方法使【shǐ】固【gù】相载【zǎi】体上【shàng】形成的抗原抗体复合物与【yǔ】其它物质分【fèn】开，zui后结合 在固相载【zǎi】体上【shàng】的酶【méi】量【liàng】与标【biāo】本【běn】中受检【jiǎn】的抗体【tǐ】或抗原量成一定比例；再加入酶反应底物后，底物被【bèi】酶催化后【hòu】变【biàn】为有色产物，根据【jù】其颜色【sè】反应的 深浅进行定性【xìng】或定量分析，以了解被测标本中抗体或抗【kàng】原含量。

ELISA免疫测定步骤：
1.包被；
2.加样：加一【yī】定稀释的待检样品0.1ml于上述【shù】已包【bāo】被之【zhī】反应孔中，置【zhì】37℃孵育1小时。然后洗涤【dí】(同时【shí】做【zuò】空白孔【kǒng】，阴性对照孔及阳性对照孔)；
3.加酶标抗体：于各反应【yīng】孔中，加入【rù】新鲜稀释的酶标抗【kàng】体(经【jīng】滴定后的稀释度【dù】)0.1ml。37℃孵育0.5～1小【xiǎo】时，洗涤。
4.加底【dǐ】物【wù】液显色：于【yú】各反应孔中加入临时配制的TMB底物【wù】溶液0.1ml，37℃10～30分钟；
5.终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml；
6.结果判定：可于白【bái】色背景上【shàng】，直接用肉眼观察结【jié】果【guǒ】：反应孔内【nèi】颜色越深，阳性程【chéng】度越强，阴性反应为无【wú】色或【huò】极浅。也【yě】可【kě】测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm处【chù】，以【yǐ】空白对照孔调零后测各【gè】孔OD值【zhí】。

    注意：引起ELISA测【cè】定错误结【jié】果的原因有标本【běn】因素、试剂【jì】因素【sù】、操作因素。如果您【nín】在【zài】操作中遇【yù】到任何不【bú】明白的，不妨来电详询本【běn】公司业【yè】务员，我们将【jiāng】为您免费安排【pái】技术指导服【fú】务（代测、培训、委托加工【gōng】、定制【zhì】等【děng】）。上海恒远生【shēng】物将与广大工【gōng】作者一起交流【liú】问题，共同提【tí】高，让您成为真正的能手【shǒu】。