进口ELISA试【shì】剂盒基【jī】础是抗原或抗体【tǐ】的【de】固【gù】相化及抗原或抗体的酶【méi】标记【jì】。结合在固相载体表面的抗原或抗体【tǐ】仍保【bǎo】持其免疫学活性，酶【méi】标记的抗【kàng】原或抗【kàng】体【tǐ】既【jì】保【bǎo】留其免【miǎn】疫学活性，又保【bǎo】留酶的活性【xìng】。在测定时，受检【jiǎn】标【biāo】本（测定其中的【de】抗体或抗原【yuán】）与固相载体表【biǎo】面的抗原或抗体起反应【yīng】。用洗涤的方法使【shǐ】固【gù】相载体上形成的抗原抗体复合物【wù】与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过【guò】反应而结合在【zài】固【gù】相载体上。此【cǐ】时固相上的【de】酶量与标本【běn】中受【shòu】检物质的量呈【chéng】一定的比例。加入酶反应【yīng】的底物后【hòu】，底物被酶催化成为有色产物，产物【wù】的量与【yǔ】标本中受检物质的【de】量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由【yóu】于酶的【de】催【cuī】化效率很【hěn】高，间接地放大【dà】了免疫反应的【de】结果，使测定【dìng】方【fāng】法达到很【hěn】高的敏感【gǎn】度。

进口ELISA试剂盒操作步骤:

1．从已平衡至室温的密封袋中取【qǔ】出试验所需板条【tiáo】，未用的板【bǎn】条和干【gàn】燥剂请放【fàng】回【huí】铝箔袋【dài】内压 实自【zì】封条，密封口袋【dài】，放回4℃。

2．空白【bái】孔加标【biāo】准品和标本【běn】稀释液【yè】，其【qí】余相应孔中加标本【běn】或不同浓度标准品(100ul/孔)，用封【fēng】板胶纸封住反应孔【kǒng】，36℃孵箱孵育90分钟。

3．提前20分钟准备生物素化抗体工作液。

4．洗板5次。

5．空白孔加生物素化【huà】抗体稀释液【yè】，其余孔【kǒng】加入【rù】生物素化抗【kàng】体工作【zuò】液(100ul/孔)。用新封板胶纸【zhǐ】封住反应【yīng】孔，36℃孵箱孵育【yù】60分钟。

6．提前【qián】20分钟准备酶结合物【wù】工作液。避光室温(9-21 ) ℃ 放置。

7．洗板5次。

8．空白孔加酶结合物稀释液【yè】，其余孔加入酶结合物【wù】工作液(100ul/孔)。用新封板【bǎn】胶纸【zhǐ】封住反【fǎn】应孔，36℃孵箱，避光孵育30分【fèn】钟。

9．打开酶标仪电源，预热仪器，设置好检测程序。

10．洗板5次。

11．加入【rù】显色【sè】底物(TMB)100ul/孔，避光36℃孵箱，避光孵【fū】育15分钟。

12．加入终止【zhǐ】液100ul/孔, 混匀后即刻测量OD450值(3分钟内)。在【zài】仪器保存【cún】读【dú】数【shù】结果并打印一【yī】份纸【zhǐ】质结果。

13．进口ELISA试剂【jì】盒实验完毕后将未用完的试剂按【àn】规定的保存温度放【fàng】回电冰箱【xiāng】保存【cún】至有【yǒu】效期结【jié】束。 建议保【bǎo】存酶标板框，以备【bèi】下次或者今后试【shì】验使用【yòng】。