大鼠 LR ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 LR ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将【jiāng】各种试剂取出放置30分钟，平【píng】衡至室温，所有标准品【pǐn】和样品必需设置平行对照【zhào】实验，快速加入试剂至样品【pǐn】中，立【lì】即漩涡【wō】震荡2秒【miǎo】混【hún】匀【yún】。

1. 依据实【shí】验键盘纸决定【dìng】酶标条的使用量【liàng】，将【jiāng】剩【shèng】余的酶标条连同干燥剂一【yī】起放回密封塑料袋，密【mì】封，4℃保存。

2. 移取【qǔ】50μL中和液至各个微孔中【zhōng】，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结合)孔【kǒng】和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结合）孔。

7. 移【yí】取【qǔ】50μL 偶【ǒu】联酶至各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液【yè】至各【gè】孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔【kǒng】。

9. 将酶标孔【kǒng】置于孔【kǒng】板【bǎn】振动器【qì】上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸上拍干微孔内【nèi】溶液，加洗涤【dí】液【yè】400μL每孔洗3次，每【měi】次需拍【pāi】干【gàn】。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在干净的无尘吸水纸上【shàng】轻【qīng】巧酶【méi】标板数次，以确保没【méi】有洗【xǐ】涤液【yè】残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色底物溶液【yè】，于室温静【jìng】置5~30分钟。（显色【sè】底物A和B需在临用【yòng】前【qián】15分钟内【nèi】等体积混【hún】合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处【chù】的光【guāng】密度【dù】值，在570nm至【zhì】590nm之间好有修正，如果【guǒ】酶标仪不能自动清除Blank(空白)孔值，那么手动扣除【chú】每个读数【shù】的Blank（空【kōng】白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时【shí】，应将各种【zhǒng】试剂管离心数分钟【zhōng】，以便试【shì】剂【jì】集中到【dào】管底。

2. 每【měi】次实验留一孔作为空白调【diào】零孔，该【gāi】孔不【bú】加任何试剂【jì】，只是zui后加【jiā】底物溶【róng】液【yè】及2N H2SO4，测量时【shí】先用此孔调OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试验【yàn】时将【jiāng】反应板放【fàng】于铺【pù】有湿布的【de】密闭盒内【nèi】，酶标板加上盖或【huò】覆膜。

4. 未使用完【wán】的酶标板或【huò】者试剂，请于【yú】9-22℃保存，标准品、生物-素标记抗【kàng】体工作液【yè】、辣根过氧化物酶【méi】标【biāo】记亲和素工作液【yè】请【qǐng】依据所需的【de】量配置使用，请勿重复使用已稀释过的标准品、生物-素标【biāo】记【jì】抗体工作液或、辣根【gēn】过氧化【huà】物【wù】酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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