大鼠 RBP4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 RBP4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用【yòng】前将各种试剂取【qǔ】出放【fàng】置30分钟，平衡至室温【wēn】，所有标准品和样【yàng】品必需【xū】设置平行对【duì】照实验，快速加入【rù】试剂至样【yàng】品中，立即漩涡震荡2秒混匀【yún】。

1. 依据实验键盘纸决【jué】定【dìng】酶标【biāo】条的使用量，将剩余的【de】酶标条连【lián】同干燥剂【jì】一起放回密封塑料袋，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中和液至【zhì】各个微孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空【kōng】白）孔。

8. 移取50μL 抗【kàng】体【tǐ】工作液至各孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非特异【yì】结合）孔。

9. 将酶标孔置于孔板振动【dòng】器上，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时【shí】。

10. 在吸水纸上【shàng】拍干微孔内溶液，加洗涤液【yè】400μL每孔洗3次，每次需【xū】拍【pāi】干。

11. 后一次洗【xǐ】涤，清空各微孔，在干净的无尘【chén】吸水纸【zhǐ】上轻巧酶标板【bǎn】数次，以确保没有洗【xǐ】涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色【sè】底【dǐ】物溶液，于室【shì】温静置5~30分【fèn】钟。（显色底【dǐ】物A和B需在临【lín】用前15分钟【zhōng】内等体积混【hún】合，并避光放置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值【zhí】，读取450nm处的光密度【dù】值，在570nm至590nm之间【jiān】好有修正，如果酶标仪【yí】不【bú】能自动清除Blank(空【kōng】白)孔值，那么【me】手动【dòng】扣除每个读【dú】数的Blank（空白【bái】）孔光【guāng】密度值【zhí】。

注意事项：

1. 用户在【zài】初【chū】次使【shǐ】用试剂【jì】盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集【jí】中到管底【dǐ】。

2. 每次实验留【liú】一孔【kǒng】作【zuò】为空白调零【líng】孔【kǒng】，该【gāi】孔不加任何试剂，只是zui后加【jiā】底物溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值至零。

3. 为防【fáng】止样品蒸发，试【shì】验时将反应【yīng】板【bǎn】放于铺有湿布的密闭盒【hé】内，酶标板加上【shàng】盖或覆膜。

4. 未使用完【wán】的酶标板【bǎn】或者试【shì】剂，请于9-22℃保存，标【biāo】准品【pǐn】、生物-素标记抗体工作液、辣根【gēn】过氧【yǎng】化物酶标记亲【qīn】和素工作液请【qǐng】依据【jù】所【suǒ】需【xū】的量配置使用，请勿重复使用已稀释过的【de】标准品、生【shēng】物-素标【biāo】记抗体工作【zuò】液或【huò】、辣根过氧化物酶标记亲和素工【gōng】作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

大鼠 RBP4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）由上海酶联生物现货供应，包括【kuò】RBP4 ELISA试【shì】剂盒、酶联免疫【yì】检【jiǎn】测试剂盒说明书、实验【yàn】原理、操作【zuò】步【bù】骤【zhòu】等产品详细介绍。