大鼠 PRA ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 PRA ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取出放置30分钟，平【píng】衡至室温，所有【yǒu】标【biāo】准品【pǐn】和样品必需设置【zhì】平行对照实验，快速加【jiā】入试【shì】剂至样【yàng】品【pǐn】中，立即漩涡震【zhèn】荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决定【dìng】酶标条的使用量，将剩余的酶标【biāo】条连【lián】同干燥剂一起放回密封【fēng】塑料袋【dài】，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至各个微孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异【yì】结【jié】合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异【yì】结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶【méi】至【zhì】各【gè】孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白【bái】）孔。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体【tǐ】工作液至各孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔【kǒng】置于孔板【bǎn】振动器上，250~500rpm，室温孵【fū】育2小时。

10. 在吸【xī】水纸上拍干微孔【kǒng】内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每次需【xū】拍干【gàn】。

11. 后一【yī】次洗涤，清空各微孔【kǒng】，在干净的【de】无尘吸【xī】水纸上轻巧【qiǎo】酶标【biāo】板数次，以确【què】保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室温静置5~30分钟。（显色底物【wù】A和B需在【zài】临用前15分钟内等体【tǐ】积混【hún】合，并避光【guāng】放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空【kōng】白）孔值，读取450nm处的光【guāng】密【mì】度值，在570nm至590nm之间【jiān】好【hǎo】有【yǒu】修正，如果酶标仪不能自动清除Blank(空白)孔值，那么手【shǒu】动扣除每【měi】个读数的Blank（空白）孔【kǒng】光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各【gè】种【zhǒng】试剂管离【lí】心数分钟【zhōng】，以【yǐ】便试【shì】剂集中到管【guǎn】底。

2. 每次【cì】实验留一孔作为空白调零孔【kǒng】，该孔不【bú】加【jiā】任何【hé】试剂，只是zui后加【jiā】底物溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值至【zhì】零。

3. 为【wéi】防止【zhǐ】样品蒸【zhēng】发，试【shì】验时将反【fǎn】应板【bǎn】放于铺有湿布的密闭盒【hé】内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未【wèi】使用完的酶标板或者试剂【jì】，请于9-22℃保存【cún】，标准品【pǐn】、生物-素标记抗体工【gōng】作液【yè】、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所【suǒ】需的【de】量配置使用，请【qǐng】勿重复【fù】使用【yòng】已稀释过的标准品、生物-素标记抗体工作【zuò】液或、辣根过【guò】氧【yǎng】化物酶【méi】标【biāo】记亲和素工作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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