大鼠 ADR ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 ADR ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试【shì】剂取出放置30分【fèn】钟【zhōng】，平衡【héng】至室温，所【suǒ】有【yǒu】标准【zhǔn】品和样品必需设置平行【háng】对【duì】照实验，快速加入试剂至样品【pǐn】中，立即漩涡【wō】震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决定酶【méi】标条的【de】使用量，将剩余的酶【méi】标【biāo】条连同干燥剂一【yī】起放回【huí】密封塑【sù】料袋【dài】，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液【yè】至各个【gè】微孔中，除【chú】了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异结合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了【le】TA（全活【huó】性）孔和【hé】Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工【gōng】作液至各孔【kǒng】中，除【chú】了TA（全活性）孔【kǒng】、Blank（空【kōng】白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将【jiāng】酶【méi】标孔置【zhì】于孔板振动【dòng】器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸【zhǐ】上拍【pāi】干【gàn】微孔【kǒng】内溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每【měi】次需【xū】拍干。

11. 后【hòu】一次洗涤，清空各微【wēi】孔，在干【gàn】净的无尘吸水纸上轻巧【qiǎo】酶【méi】标板【bǎn】数次，以【yǐ】确保没【méi】有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底【dǐ】物溶【róng】液，于室【shì】温静置5~30分钟【zhōng】。（显色底物A和B需在【zài】临用前15分【fèn】钟内等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标【biāo】仪Blank（空白【bái】）孔值，读取450nm处【chù】的【de】光密度值，在【zài】570nm至590nm之间好有修正，如【rú】果酶标仪不能自动清除Blank(空白)孔【kǒng】值【zhí】，那么手动扣除每个读数的Blank（空白）孔光密度【dù】值【zhí】。

注意事项：

1. 用户在初次使【shǐ】用试【shì】剂盒【hé】时，应将各【gè】种试剂管离【lí】心数分钟，以便【biàn】试剂集中到管底【dǐ】。

2. 每次实验留一孔作为空白调零【líng】孔，该孔【kǒng】不【bú】加任何试剂【jì】，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量【liàng】时先【xiān】用此孔调OD值至零【líng】。

3. 为防止【zhǐ】样品蒸【zhēng】发【fā】，试验【yàn】时【shí】将反应板放于铺有湿布的密闭【bì】盒内，酶标【biāo】板加上盖或覆膜。

4. 未使【shǐ】用完【wán】的酶标板或者试剂【jì】，请于9-22℃保存，标准【zhǔn】品、生物【wù】-素标记【jì】抗体工【gōng】作液【yè】、辣根过【guò】氧化物酶标记亲和【hé】素工作液请依据【jù】所需的量配置使用【yòng】，请勿重【chóng】复使用已稀释过的标【biāo】准品、生物-素标记抗体工【gōng】作液或、辣【là】根【gēn】过氧化物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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