大鼠 NF ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 NF ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试【shì】剂取出【chū】放【fàng】置30分钟，平衡至室温，所有标准品【pǐn】和样品必需【xū】设【shè】置平行对照实验【yàn】，快速加【jiā】入试剂至样品中【zhōng】，立即漩【xuán】涡震【zhèn】荡2秒混匀。

1. 依【yī】据实验键盘纸决定酶【méi】标条的使用量【liàng】，将剩余【yú】的【de】酶标条连同【tóng】干【gàn】燥剂一起放【fàng】回密封【fēng】塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移【yí】取50μL中和液至各【gè】个微孔中【zhōng】，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结【jié】合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结合）孔【kǒng】。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶【méi】至各孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

8. 移取50μL 抗【kàng】体工【gōng】作【zuò】液至【zhì】各孔【kǒng】中，除了TA（全活性【xìng】）孔【kǒng】、Blank（空【kōng】白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔【kǒng】置于【yú】孔【kǒng】板【bǎn】振动【dòng】器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在【zài】吸水纸【zhǐ】上拍干【gàn】微孔内【nèi】溶液，加【jiā】洗涤液400μL每孔洗3次，每【měi】次需拍干。

11. 后一次洗涤，清【qīng】空各微孔，在干净【jìng】的无【wú】尘吸水纸上轻【qīng】巧酶标板数次【cì】，以确保【bǎo】没有洗涤液残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显【xiǎn】色底物溶液，于室【shì】温静置5~30分钟。（显色底物A和B需在临用前15分钟内等体积【jī】混合，并避光放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶标仪Blank（空【kōng】白）孔值，读取450nm处的【de】光密度值，在【zài】570nm至590nm之间【jiān】好有修正【zhèng】，如果【guǒ】酶标仪不能自动清除Blank(空白【bái】)孔值，那么手动【dòng】扣除每个读数的Blank（空白）孔【kǒng】光密度值。

注意事项：

1. 用户【hù】在【zài】初次使用试剂盒时，应【yīng】将【jiāng】各种试剂管离【lí】心数分钟，以便试剂【jì】集中到管【guǎn】底。

2. 每次实【shí】验留一孔作为空白调零孔，该孔不【bú】加任何【hé】试剂，只【zhī】是zui后加底物溶液及【jí】2N H2SO4，测【cè】量时先用【yòng】此【cǐ】孔调OD值至零。

3. 为防【fáng】止样品蒸发，试【shì】验【yàn】时【shí】将反应板放于铺有湿布的【de】密闭盒内，酶标板加【jiā】上盖或覆膜。

4. 未使用【yòng】完【wán】的酶【méi】标板或者试剂，请【qǐng】于9-22℃保存，标准品、生物-素标记抗体工作液【yè】、辣根过氧化物酶标【biāo】记亲和素工作【zuò】液请依据所需【xū】的量配置【zhì】使用，请勿【wù】重复【fù】使【shǐ】用已稀【xī】释过【guò】的【de】标准品、生物-素【sù】标记抗体工作液或、辣根过氧【yǎng】化物酶标记亲和素工【gōng】作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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