大鼠 EP ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 EP ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种【zhǒng】试剂取【qǔ】出放【fàng】置30分钟，平衡至室温，所有【yǒu】标准【zhǔn】品和样品必需设置平行【háng】对照【zhào】实验，快【kuài】速加入试【shì】剂【jì】至样品中，立即漩涡【wō】震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决定酶标条【tiáo】的使用【yòng】量，将剩【shèng】余的酶标条连【lián】同干燥剂一【yī】起放回密封【fēng】塑料袋，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中和液【yè】至各【gè】个微孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结合)孔【kǒng】和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特异结【jié】合【hé】）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除【chú】了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取【qǔ】50μL 抗【kàng】体工作液至各孔中【zhōng】，除了TA（全【quán】活性）孔、Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔置【zhì】于孔板振动器上【shàng】，250~500rpm，室温孵育【yù】2小时。

10. 在吸【xī】水纸上拍干【gàn】微孔内溶液，加洗涤液【yè】400μL每孔【kǒng】洗3次，每次【cì】需拍【pāi】干。

11. 后一【yī】次洗涤，清【qīng】空各微孔，在干【gàn】净的无尘吸水纸【zhǐ】上【shàng】轻巧【qiǎo】酶标板数次，以确保没有洗涤【dí】液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底【dǐ】物溶液【yè】，于室温静置5~30分钟。（显色【sè】底【dǐ】物A和B需在临用【yòng】前15分【fèn】钟内等体【tǐ】积混合，并避光放置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶【méi】标仪Blank（空白）孔【kǒng】值，读【dú】取450nm处的光密度值【zhí】，在570nm至590nm之间好有修正，如果酶【méi】标仪不能自动清除Blank(空【kōng】白)孔【kǒng】值【zhí】，那么手动扣【kòu】除每个读数的Blank（空白）孔光密度值【zhí】。

注意事项：

1. 用户在初次使用【yòng】试【shì】剂盒时，应将各种试【shì】剂管离心数分钟【zhōng】，以便试【shì】剂【jì】集中【zhōng】到管底。

2. 每次实验留一孔作为【wéi】空白【bái】调零孔，该孔不【bú】加任何试剂，只是zui后【hòu】加底物溶液【yè】及2N H2SO4，测量时先用此孔【kǒng】调OD值【zhí】至零。

3. 为【wéi】防止样【yàng】品蒸发，试验时【shí】将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标【biāo】板【bǎn】加上盖或覆膜。

4. 未使用【yòng】完的【de】酶标板或者试剂，请于【yú】9-22℃保【bǎo】存，标准品、生物【wù】-素标记抗【kàng】体【tǐ】工作液【yè】、辣【là】根【gēn】过氧化物酶【méi】标记亲和素工作液请依据所需的量【liàng】配置使用【yòng】，请【qǐng】勿重复使用已稀释过的标【biāo】准品、生物-素【sù】标记抗【kàng】体工作液或、辣根过氧化物【wù】酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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