大鼠 KRT19 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 KRT19 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试【shì】剂取出放置【zhì】30分钟，平衡至室温，所【suǒ】有标准品和样品必【bì】需【xū】设【shè】置平【píng】行对照实验，快速加入试剂至【zhì】样品【pǐn】中【zhōng】，立即【jí】漩涡震荡2秒混匀【yún】。

1. 依据实验【yàn】键盘纸决定酶标【biāo】条的使用量，将【jiāng】剩【shèng】余的酶【méi】标【biāo】条【tiáo】连同【tóng】干燥剂一起放回密封塑料袋，密【mì】封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至【zhì】各个微孔中【zhōng】，除了TA（全活【huó】性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结【jié】合）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶至各孔中，除了TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

8. 移取50μL 抗体【tǐ】工【gōng】作液至各孔中，除了TA（全【quán】活性【xìng】）孔【kǒng】、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置于孔板振动【dòng】器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育【yù】2小时。

10. 在吸水【shuǐ】纸上【shàng】拍干微孔内溶液，加洗涤液【yè】400μL每孔洗3次【cì】，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空【kōng】各微孔，在【zài】干净的无尘吸水纸【zhǐ】上轻巧酶标板数次，以【yǐ】确保没有洗【xǐ】涤液【yè】残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色【sè】底【dǐ】物溶液【yè】，于【yú】室【shì】温静置5~30分钟【zhōng】。（显色底【dǐ】物A和B需在临用【yòng】前【qián】15分钟内等体【tǐ】积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密度值，在【zài】570nm至590nm之间好有修正，如【rú】果【guǒ】酶标【biāo】仪【yí】不能自【zì】动清除Blank(空白)孔值【zhí】，那么手动【dòng】扣除每个【gè】读数的【de】Blank（空白）孔【kǒng】光密【mì】度值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在【zài】初次使用【yòng】试剂盒时，应将各种试【shì】剂管离心数分钟，以便试剂集中到【dào】管底【dǐ】。

2. 每次实验留【liú】一孔作为空白调【diào】零【líng】孔，该孔不加任何试剂，只是zui后【hòu】加底物溶液【yè】及2N H2SO4，测量时【shí】先用此孔调OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试验时【shí】将反应板【bǎn】放于铺有【yǒu】湿布的密闭盒内，酶标【biāo】板加【jiā】上盖【gài】或【huò】覆膜。

4. 未使用完【wán】的酶标板或【huò】者试剂，请于【yú】9-20℃保存，标准【zhǔn】品、生物【wù】-素标记抗体【tǐ】工作液、辣根过氧【yǎng】化物酶标记亲和素工作液请依据所需【xū】的量配置使【shǐ】用，请【qǐng】勿重复【fù】使【shǐ】用【yòng】已稀【xī】释过的标准品、生物【wù】-素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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