大鼠HIF1α ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠HIF1α ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种【zhǒng】试剂【jì】取出放置【zhì】30分钟，平【píng】衡至【zhì】室温，所有标【biāo】准品和【hé】样品必需设【shè】置平行【háng】对照实【shí】验，快速加入试剂至样品中，立即漩涡【wō】震荡2秒混匀。

1. 依据实验【yàn】键盘纸决【jué】定酶标【biāo】条的使用量，将剩余【yú】的【de】酶标【biāo】条【tiáo】连同干燥剂一起放回密封塑料袋，密【mì】封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各【gè】个微孔中【zhōng】，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异【yì】结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶【ǒu】联酶至各孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和【hé】Blank（空白【bái】）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗体【tǐ】工作液至【zhì】各孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔置于【yú】孔板振动器【qì】上，250~500rpm，室温孵【fū】育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸上拍干【gàn】微孔【kǒng】内溶液，加洗涤液【yè】400μL每孔洗【xǐ】3次，每【měi】次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在【zài】干【gàn】净的【de】无尘吸【xī】水纸上轻巧酶标板数【shù】次，以确【què】保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液【yè】，于【yú】室温静置5~30分钟。（显色底【dǐ】物【wù】A和B需【xū】在临用【yòng】前15分钟内等体积混合，并【bìng】避光放置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标仪Blank（空白【bái】）孔值，读取450nm处的光【guāng】密度值，在570nm至590nm之间好有修【xiū】正，如果【guǒ】酶标仪不能【néng】自【zì】动清除Blank(空白)孔值，那么手动扣除每个读数的Blank（空白）孔光密【mì】度值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次使用试剂盒时，应将各【gè】种试剂管离心数【shù】分【fèn】钟【zhōng】，以便试剂【jì】集中到管底。

2. 每次【cì】实验留一孔作【zuò】为空白调【diào】零孔，该孔不加【jiā】任何试剂，只是【shì】zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时先用【yòng】此孔调OD值【zhí】至零。

3. 为防止样【yàng】品蒸发，试验时将反【fǎn】应板放于【yú】铺有湿布【bù】的密闭盒内，酶标板加上盖【gài】或【huò】覆膜。

4. 未使用完【wán】的酶标板或者试剂，请于9-23℃保【bǎo】存，标准【zhǔn】品、生【shēng】物-素标记【jì】抗体工【gōng】作液、辣根过氧化物【wù】酶标记亲和素工作液请依【yī】据所需【xū】的量配置使用，请勿重复使用已稀释过的标准【zhǔn】品、生物-素【sù】标记【jì】抗【kàng】体工作【zuò】液【yè】或、辣根【gēn】过氧化物酶标【biāo】记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

大鼠HIF1α ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）由上海酶联【lián】生物【wù】现货供应，包括【kuò】HIF1α ELISA试剂盒、酶联免疫检测试剂盒说明书、实验原理、操作步【bù】骤等产品详细介【jiè】绍【shào】。