大鼠 LDL-C ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 LDL-C ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将【jiāng】各种试【shì】剂取出放置30分钟，平衡至室【shì】温，所有标准品和样品【pǐn】必需设置平行对【duì】照实验，快速加【jiā】入试剂【jì】至样【yàng】品中【zhōng】，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决【jué】定酶【méi】标【biāo】条的使用量，将剩余【yú】的酶标【biāo】条连同干燥剂【jì】一起放回【huí】密【mì】封【fēng】塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个微孔【kǒng】中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空【kōng】白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔【kǒng】和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶【ǒu】联【lián】酶【méi】至各孔中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔【kǒng】、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非【fēi】特【tè】异结【jié】合）孔。

9. 将【jiāng】酶标【biāo】孔置于【yú】孔板振动器【qì】上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸【xī】水纸【zhǐ】上【shàng】拍干微孔内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每次【cì】需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在【zài】干净的无尘吸水【shuǐ】纸【zhǐ】上轻【qīng】巧酶标板数次【cì】，以【yǐ】确保【bǎo】没【méi】有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底物溶液【yè】，于室温静置5~30分【fèn】钟【zhōng】。（显色【sè】底【dǐ】物A和B需在【zài】临用【yòng】前15分【fèn】钟内等体【tǐ】积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空【kōng】白）孔值，读取450nm处的光密度值，在【zài】570nm至【zhì】590nm之【zhī】间好有修正，如果【guǒ】酶标仪【yí】不能【néng】自动清【qīng】除【chú】Blank(空白)孔值【zhí】，那么手动扣除每个读数的Blank（空白【bái】）孔光密度值【zhí】。

注意事项：

1. 用户【hù】在初【chū】次使【shǐ】用试剂盒时，应【yīng】将各种试【shì】剂管离【lí】心【xīn】数分钟，以便试剂集中到管底。

2. 每【měi】次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任【rèn】何试剂，只【zhī】是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时【shí】先用此【cǐ】孔调OD值至零。

3. 为【wéi】防止样品【pǐn】蒸发，试验时将反应板【bǎn】放于铺有湿布的密闭【bì】盒【hé】内，酶标板加上盖【gài】或覆膜。

4. 未使【shǐ】用完的酶标板【bǎn】或者试剂，请【qǐng】于9-23℃保存，标准品、生【shēng】物-素标【biāo】记抗体工【gōng】作【zuò】液【yè】、辣根过【guò】氧化物【wù】酶标记亲和素工【gōng】作液请【qǐng】依据所需的量配【pèi】置使用，请【qǐng】勿重复使用已稀释过【guò】的标准品、生物【wù】-素标记抗【kàng】体工【gōng】作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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