大鼠 VLDL ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 VLDL ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用【yòng】前将【jiāng】各【gè】种试剂取出放【fàng】置30分钟，平衡【héng】至室温，所【suǒ】有标准品和样【yàng】品必需设置【zhì】平行对照实验，快速加入试剂至样品中，立即【jí】漩【xuán】涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验【yàn】键【jiàn】盘纸决定酶标条的使用量，将剩余的【de】酶【méi】标条连同【tóng】干燥剂一【yī】起放回密封塑料袋【dài】，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至各【gè】个【gè】微孔中，除了TA（全【quán】活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和【hé】B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶【ǒu】联酶至各孔中，除了TA（全【quán】活性）孔【kǒng】和【hé】Blank（空白）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗体【tǐ】工作液至各孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空【kōng】白）孔和NSB（非【fēi】特异【yì】结合）孔。

9. 将酶标孔置于【yú】孔板【bǎn】振动【dòng】器上，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时。

10. 在【zài】吸水纸【zhǐ】上【shàng】拍干微孔内溶液，加洗【xǐ】涤液400μL每孔洗3次，每次【cì】需拍干。

11. 后一【yī】次洗【xǐ】涤，清【qīng】空各微孔，在干净的【de】无尘吸水纸上轻【qīng】巧酶标板数次，以【yǐ】确保没有洗涤液【yè】残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶【róng】液，于【yú】室温静置5~30分钟。（显【xiǎn】色底物A和B需在临【lín】用前15分钟内等体【tǐ】积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标【biāo】仪Blank（空白）孔值【zhí】，读取450nm处的光密【mì】度值，在570nm至590nm之间【jiān】好有修正，如果酶标仪【yí】不能自【zì】动清【qīng】除Blank(空白)孔值，那么【me】手动扣除【chú】每个读数的Blank（空【kōng】白【bái】）孔光密度值【zhí】。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次使用试剂盒时，应将【jiāng】各种试剂【jì】管离【lí】心数分钟【zhōng】，以便【biàn】试剂集中到【dào】管底。

2. 每次实【shí】验留【liú】一孔作为【wéi】空白调零孔，该孔【kǒng】不加任【rèn】何试【shì】剂，只是zui后加底【dǐ】物溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值至零。

3. 为【wéi】防止【zhǐ】样【yàng】品【pǐn】蒸发，试验时将反应板放于铺有【yǒu】湿布的密闭盒内，酶标板加【jiā】上盖或覆膜。

4. 未使用完【wán】的酶标板或者试剂，请于9-23℃保存，标准【zhǔn】品【pǐn】、生物-素标记抗体【tǐ】工作液、辣根过氧化物酶【méi】标记亲和素工作液请【qǐng】依据所【suǒ】需【xū】的【de】量【liàng】配置使用，请勿重复使用已稀释过的【de】标准【zhǔn】品【pǐn】、生物-素【sù】标记【jì】抗体工作液或、辣根过氧化物酶标【biāo】记亲和【hé】素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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