大鼠COLIAb ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠COLIAb ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各【gè】种【zhǒng】试剂取出放置30分钟，平【píng】衡至室【shì】温，所有标准品和样品必需设置平行【háng】对【duì】照实验，快速加入试剂至样【yàng】品中，立即漩【xuán】涡【wō】震【zhèn】荡2秒混匀【yún】。

1. 依【yī】据实验键盘纸决定【dìng】酶标条的使用【yòng】量，将剩余的【de】酶标条连同【tóng】干燥剂【jì】一起放【fàng】回密封【fēng】塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个微孔【kǒng】中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取【qǔ】50μL 偶【ǒu】联酶至各孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和【hé】Blank（空【kōng】白）孔。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体工作液至各孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白【bái】）孔和【hé】NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔置【zhì】于【yú】孔板振动器上【shàng】，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水【shuǐ】纸上拍干微孔【kǒng】内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次【cì】，每次需拍【pāi】干。

11. 后一次【cì】洗涤【dí】，清空【kōng】各微孔，在干净的无尘吸水纸上轻巧酶标板【bǎn】数次，以确保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室温静【jìng】置5~30分钟。（显色底物【wù】A和B需在临用前15分钟内【nèi】等体【tǐ】积混合【hé】，并避光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处【chù】的光密度值【zhí】，在570nm至590nm之间好【hǎo】有修正，如果酶标【biāo】仪不【bú】能自【zì】动清除Blank(空白)孔值，那么【me】手动扣【kòu】除每个读数的Blank（空白【bái】）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初【chū】次使用【yòng】试剂【jì】盒【hé】时，应将各种试剂管离心数分钟，以便【biàn】试剂集中【zhōng】到管【guǎn】底。

2. 每次实验留一孔作为空白调零【líng】孔，该【gāi】孔不加【jiā】任何试剂【jì】，只是zui后加底物【wù】溶液及2N H2SO4，测量时【shí】先用此【cǐ】孔调OD值至【zhì】零。

3. 为【wéi】防【fáng】止样【yàng】品蒸发，试验时将反应板放于【yú】铺【pù】有湿布的密闭盒内，酶标板加上【shàng】盖或覆膜。

4. 未使【shǐ】用完的酶标板或者试剂【jì】，请于9-23℃保存，标准品、生【shēng】物-素标记【jì】抗体工作液、辣根过氧【yǎng】化物酶标记【jì】亲和素工作液请【qǐng】依据【jù】所需的【de】量配【pèi】置使用，请勿【wù】重复使用【yòng】已稀释【shì】过的标准品、生物-素【sù】标记抗体【tǐ】工作液或、辣根过氧化物【wù】酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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