大鼠 E1 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 E1 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用【yòng】前将各种试【shì】剂取出放置30分钟，平【píng】衡至室温，所【suǒ】有标准品和样【yàng】品必需设置【zhì】平【píng】行对【duì】照实验【yàn】，快速加入试剂至样品【pǐn】中，立即漩涡震荡2秒【miǎo】混匀。

1. 依据实验键盘纸决定酶【méi】标【biāo】条的使【shǐ】用量，将剩余的【de】酶标条连同干【gàn】燥剂一【yī】起【qǐ】放回密封塑料【liào】袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液【yè】至各个微孔中，除【chú】了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白【bái】）孔【kǒng】。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异【yì】结合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结合）孔。

7. 移取【qǔ】50μL 偶联酶至各孔中【zhōng】，除【chú】了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗【kàng】体工作液至【zhì】各孔中，除了【le】TA（全活性）孔、Blank（空【kōng】白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶【méi】标孔置于【yú】孔板振动【dòng】器上，250~500rpm，室【shì】温孵育2小时【shí】。

10. 在吸【xī】水【shuǐ】纸上拍干微孔内溶【róng】液，加洗涤【dí】液400μL每孔洗3次【cì】，每【měi】次需拍干。

11. 后【hòu】一次洗涤【dí】，清空各微孔，在干净的无尘【chén】吸水纸【zhǐ】上轻巧【qiǎo】酶【méi】标板数次，以确保没有洗涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室温静置5~30分钟。（显【xiǎn】色底物【wù】A和B需在临用前15分【fèn】钟【zhōng】内【nèi】等体积【jī】混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除【chú】酶标仪Blank（空白）孔值，读取【qǔ】450nm处的【de】光【guāng】密度值，在570nm至590nm之间好有修正，如果【guǒ】酶标【biāo】仪不能自【zì】动清除【chú】Blank(空白)孔值，那【nà】么手动扣除每个【gè】读数的Blank（空白）孔光密度【dù】值。

注意事项：

1. 用户在初次使用【yòng】试剂盒时，应将【jiāng】各种试【shì】剂管离心数分钟，以【yǐ】便【biàn】试剂集中到管底。

2. 每【měi】次实验【yàn】留一孔作为空白调【diào】零孔，该孔【kǒng】不加任何试剂，只是zui后加底物溶液【yè】及2N H2SO4，测量时先用此孔【kǒng】调OD值至零。

3. 为【wéi】防止样品蒸发，试【shì】验时将反应【yīng】板放于铺有湿【shī】布的密闭【bì】盒内，酶标板【bǎn】加上【shàng】盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板【bǎn】或【huò】者【zhě】试剂，请于9-23℃保【bǎo】存，标准品、生【shēng】物-素标记抗体工作液【yè】、辣根【gēn】过氧化物酶标记亲和素工作液请依【yī】据所需的【de】量配置使【shǐ】用，请勿重复使用已稀释过的标准【zhǔn】品、生物-素标记抗体工【gōng】作液【yè】或、辣根过【guò】氧【yǎng】化物酶标【biāo】记【jì】亲和素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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