大鼠 SOD2 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 SOD2 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用【yòng】前将【jiāng】各种试剂取【qǔ】出放【fàng】置【zhì】30分钟，平衡至室温，所有标准品和【hé】样【yàng】品必需设【shè】置平行对照实验【yàn】，快速加入试剂至样品中，立即【jí】漩【xuán】涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验【yàn】键【jiàn】盘纸决定酶标条的使用量，将【jiāng】剩余【yú】的酶标条连同干燥剂【jì】一起放回密封塑料袋【dài】，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至各个微孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶【ǒu】联酶至各【gè】孔中，除【chú】了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔【kǒng】中，除了【le】TA（全【quán】活性【xìng】）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特【tè】异结合【hé】）孔。

9. 将【jiāng】酶标孔【kǒng】置于孔板振【zhèn】动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵【fū】育2小时。

10. 在吸水纸上【shàng】拍干微【wēi】孔内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每孔洗【xǐ】3次，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在干净的无尘吸水纸上【shàng】轻巧酶标板【bǎn】数【shù】次【cì】，以【yǐ】确【què】保没有【yǒu】洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底物溶液，于室温静置【zhì】5~30分钟【zhōng】。（显【xiǎn】色【sè】底物A和B需在临用前15分钟内【nèi】等体【tǐ】积混【hún】合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标仪【yí】Blank（空白【bái】）孔值，读取450nm处【chù】的光密度值【zhí】，在570nm至【zhì】590nm之间好有修正，如果酶标仪不【bú】能【néng】自动清除Blank(空白【bái】)孔值，那么手动扣【kòu】除每个读【dú】数的Blank（空【kōng】白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次使用试剂【jì】盒时【shí】，应将【jiāng】各种【zhǒng】试剂管离心数分钟【zhōng】，以便试剂集中到管底。

2. 每【měi】次实验留一孔作为空白调零孔，该孔【kǒng】不【bú】加任何试剂，只是zui后【hòu】加底【dǐ】物溶液【yè】及2N H2SO4，测量时【shí】先用此孔调OD值至零【líng】。

3. 为【wéi】防止样品蒸发，试验时【shí】将反应板【bǎn】放于铺【pù】有湿布的密闭盒内，酶【méi】标板【bǎn】加上【shàng】盖或覆膜。

4. 未使用完的【de】酶标板或【huò】者试剂，请【qǐng】于9-23℃保存，标准品、生【shēng】物-素标记抗体工作液【yè】、辣根【gēn】过【guò】氧化【huà】物酶【méi】标记亲和素工【gōng】作液请依据【jù】所需的量配置【zhì】使用，请【qǐng】勿重复【fù】使用已【yǐ】稀释过的标准【zhǔn】品、生物【wù】-素【sù】标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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