大鼠 SOD1 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 SOD1 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前【qián】将【jiāng】各种试剂取出【chū】放置30分钟，平衡至室【shì】温，所【suǒ】有标【biāo】准品和样品必需设置平行【háng】对照实验，快速加入试剂至【zhì】样品中，立即【jí】漩涡震荡【dàng】2秒混匀。

1. 依据【jù】实验键盘纸决定酶标条【tiáo】的使用【yòng】量【liàng】，将剩余的酶标条连同干燥剂一起【qǐ】放回密【mì】封塑料袋，密【mì】封，4℃保存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至各个微【wēi】孔中【zhōng】，除了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异【yì】结合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各【gè】孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗体工【gōng】作液至各孔中【zhōng】，除了TA（全【quán】活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔置于孔板【bǎn】振动器上，250~500rpm，室【shì】温【wēn】孵育2小时。

10. 在吸水纸【zhǐ】上拍【pāi】干【gàn】微孔【kǒng】内溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每【měi】次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微【wēi】孔，在干【gàn】净的【de】无尘【chén】吸水纸上轻巧酶标板【bǎn】数次，以确【què】保没有洗涤液残【cán】留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底【dǐ】物溶液【yè】，于室温静置5~30分钟。（显色底物A和B需在临【lín】用前15分钟【zhōng】内等体积【jī】混【hún】合【hé】，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空【kōng】白【bái】）孔值，读取450nm处的光【guāng】密度值，在【zài】570nm至590nm之【zhī】间【jiān】好有修正，如果酶标【biāo】仪不能自动清除【chú】Blank(空白)孔值，那么手动扣除【chú】每个读数【shù】的Blank（空白）孔光密度值【zhí】。

注意事项：

1. 用户【hù】在【zài】初次使用试剂盒时，应将各种试剂管【guǎn】离心【xīn】数分钟，以便试剂集中【zhōng】到管底。

2. 每次实验留一孔【kǒng】作【zuò】为空白调【diào】零孔，该【gāi】孔不加任何试剂，只是zui后加底物溶液【yè】及【jí】2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值至零【líng】。

3. 为防止样品蒸发，试验时将【jiāng】反应板放于铺【pù】有湿【shī】布的【de】密闭盒内，酶标【biāo】板加上盖【gài】或覆膜。

4. 未使用完【wán】的【de】酶标【biāo】板或者试剂，请于9-23℃保存【cún】，标准品、生【shēng】物-素【sù】标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标【biāo】记亲和素工作液请依据所需的量配置使【shǐ】用，请勿【wù】重【chóng】复使用已【yǐ】稀释过的【de】标准品【pǐn】、生物-素标记【jì】抗体工作液或【huò】、辣根过氧【yǎng】化物酶标记亲和素工【gōng】作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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