大鼠 IL4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 IL4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将【jiāng】各种试剂取出放置30分【fèn】钟，平衡【héng】至【zhì】室温【wēn】，所有标准【zhǔn】品和样【yàng】品必需设置平行对照实【shí】验，快速加入试剂至样品【pǐn】中，立即漩【xuán】涡【wō】震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘【pán】纸决定酶【méi】标条的使用量，将剩余的酶标条连同干燥剂【jì】一【yī】起放【fàng】回密封塑料袋，密封【fēng】，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个【gè】微孔中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非【fēi】特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结合）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶至各孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体【tǐ】工【gōng】作【zuò】液至各孔中，除了TA（全【quán】活性）孔、Blank（空【kōng】白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将【jiāng】酶标孔【kǒng】置于孔板振动器上【shàng】，250~500rpm，室温孵育2小时【shí】。

10. 在吸水纸上拍【pāi】干微孔内【nèi】溶液【yè】，加洗涤液【yè】400μL每孔洗【xǐ】3次，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空【kōng】各【gè】微孔，在干净【jìng】的无尘吸水纸【zhǐ】上轻巧酶【méi】标板数次，以确保没有洗涤液【yè】残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物【wù】溶液，于【yú】室温静置5~30分【fèn】钟。（显色底【dǐ】物A和【hé】B需在临用前15分钟内等体【tǐ】积混合，并避光放【fàng】置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶标仪Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】值，读取【qǔ】450nm处的光【guāng】密度值，在570nm至590nm之间【jiān】好有【yǒu】修正，如果酶标仪【yí】不能自动清除Blank(空白)孔【kǒng】值，那么手动扣除【chú】每【měi】个读【dú】数的Blank（空白）孔光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用户【hù】在初【chū】次使用试剂盒时【shí】，应【yīng】将各种试剂管离心数【shù】分【fèn】钟，以便试【shì】剂集中到管底。

2. 每次实【shí】验留一孔作为【wéi】空白调零孔，该【gāi】孔不加任何试剂，只【zhī】是zui后加【jiā】底物溶液【yè】及2N H2SO4，测量时先用此【cǐ】孔调OD值至零。

3. 为防【fáng】止样品蒸发，试验时【shí】将反应板【bǎn】放于铺【pù】有湿布的密闭盒内，酶标板加上【shàng】盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板或【huò】者试剂，请于9-23℃保存，标准品、生物-素标记【jì】抗【kàng】体工作【zuò】液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作【zuò】液请依据所需【xū】的量配置【zhì】使用，请勿【wù】重复使用【yòng】已【yǐ】稀释过的标准【zhǔn】品、生【shēng】物-素【sù】标记抗体工作液或、辣根过【guò】氧化物【wù】酶标记【jì】亲和素【sù】工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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