产品时间:2024-9-23
大鼠 L-33 ELISA试剂盒(酶【méi】联免【miǎn】疫检测法【fǎ】)由上海酶联生物提【tí】供,包括 L-33 ELISA试剂盒说明书【shū】,酶联免【miǎn】疫检测试【shì】剂盒免费代【dài】测【cè】等产品详【xiáng】细介绍【shào】。
中文名称:大鼠 L-33 ELISA试剂盒(酶联免疫检测法)
产品规格:48T/96
产品存储:低温、避光保存
产品库存:现货供应
产品分类:酶联免疫试剂盒
产品用途:仅供检测,不得用于临床
发货方式:专门快递免费送货上门
实验步骤:
使用【yòng】前将各种试剂取出放【fàng】置30分钟,平【píng】衡至【zhì】室温,所有标【biāo】准品和样品【pǐn】必需设置平行对【duì】照【zhào】实验,快速加【jiā】入试剂至样【yàng】品中,立【lì】即漩涡震荡2秒混匀。
1. 依据实验键盘纸决定酶标【biāo】条的使用【yòng】量,将剩【shèng】余的酶标条连同干燥【zào】剂一起放回密封塑料【liào】袋,密封【fēng】,4℃保存。
2. 移取【qǔ】50μL中和【hé】液至各个微【wēi】孔中,除了TA(全活性)孔和Blank(空白)孔【kǒng】。
3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结合)孔【kǒng】和B0孔【kǒng】(0 pmol/mL cAMP标准品)。
4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。
5. 移取100μL样品至相应的孔。
6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔。
7. 移取50μL 偶【ǒu】联酶至各孔【kǒng】中,除【chú】了TA(全活性)孔和【hé】Blank(空白)孔。
8. 移取50μL 抗【kàng】体【tǐ】工作液至各孔中,除【chú】了TA(全活性【xìng】)孔、Blank(空白)孔【kǒng】和NSB(非特异结合)孔。
9. 将【jiāng】酶标孔置于孔板振动【dòng】器上,250~500rpm,室温【wēn】孵育【yù】2小时。
10. 在吸水纸【zhǐ】上【shàng】拍干微孔内溶液,加洗涤液【yè】400μL每孔洗3次,每次需【xū】拍干【gàn】。
11. 后一次洗涤,清空各微孔,在【zài】干净的无尘吸水【shuǐ】纸【zhǐ】上轻【qīng】巧【qiǎo】酶标板数次【cì】,以【yǐ】确保没有【yǒu】洗涤液残留。
12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。
13. 每孔200μL显色【sè】底【dǐ】物溶【róng】液,于室温静置5~30分钟。(显色底物A和B需在临用前【qián】15分钟内等体积混合【hé】,并避光放置【zhì】)。
14. 每孔加入50μL终止液,终止后立即读数。
15. 清除【chú】酶标仪【yí】Blank(空白)孔值【zhí】,读取450nm处的光【guāng】密度值【zhí】,在570nm至590nm之【zhī】间好有修正,如果酶标仪不能自动清除【chú】Blank(空白)孔【kǒng】值【zhí】,那么手动扣除每【měi】个读数的Blank(空白)孔光密【mì】度【dù】值【zhí】。
注意事项:
1. 用户在初【chū】次使用试剂盒时【shí】,应将各种试剂【jì】管【guǎn】离【lí】心数分钟,以便试【shì】剂集中到管【guǎn】底。
2. 每【měi】次实验【yàn】留一【yī】孔作为空白调零孔【kǒng】,该孔【kǒng】不加任何试剂,只【zhī】是zui后加底物【wù】溶液及2N H2SO4,测量时先用此孔调OD值至零【líng】。
3. 为防止样品蒸发,试验时将反【fǎn】应板放于铺有湿【shī】布【bù】的密闭盒内【nèi】,酶【méi】标板加上盖或覆膜【mó】。
4. 未使用完的酶标板或者试剂,请于【yú】9-23℃保存【cún】,标准品、生物【wù】-素【sù】标记抗体工作液、辣根【gēn】过【guò】氧化物【wù】酶标记亲和【hé】素工作液请依据所需的量配置使用【yòng】,请【qǐng】勿重【chóng】复使用已【yǐ】稀释【shì】过【guò】的标准品、生物-素【sù】标记抗体工作液或【huò】、辣根过氧化物酶标记亲和【hé】素工作液【yè】。
5. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
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