大鼠 IL-3 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 IL-3 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂【jì】取【qǔ】出【chū】放置30分钟，平衡至【zhì】室温，所有标准品和样品【pǐn】必需设置平行对照实验，快速【sù】加【jiā】入试【shì】剂至【zhì】样品中，立即漩涡【wō】震荡2秒混匀【yún】。

1. 依据【jù】实验键盘纸决定【dìng】酶标条的【de】使用量【liàng】，将剩余的酶标条连【lián】同干【gàn】燥剂一起放回密封塑料袋，密封，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中和液至各个微孔中，除了TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白【bái】）孔【kǒng】。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结【jié】合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔【kǒng】。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶至各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔【kǒng】中，除了【le】TA（全活【huó】性）孔、Blank（空【kōng】白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶【méi】标【biāo】孔置于孔板振动器上，250~500rpm，室【shì】温孵育2小时【shí】。

10. 在吸水纸上拍干微孔内溶液，加洗涤液400μL每孔洗【xǐ】3次【cì】，每次需拍【pāi】干【gàn】。

11. 后一次洗涤，清【qīng】空各微孔，在【zài】干净的无尘吸水纸【zhǐ】上【shàng】轻巧酶标【biāo】板数次，以【yǐ】确保没有洗涤【dí】液残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物【wù】溶【róng】液，于室温静【jìng】置5~30分钟。（显色底物A和B需在临用前15分【fèn】钟内【nèi】等体积混合，并避【bì】光【guāng】放【fàng】置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处【chù】的【de】光密度值【zhí】，在570nm至590nm之【zhī】间好有修正，如【rú】果酶标【biāo】仪不能自动清除Blank(空白)孔值，那【nà】么【me】手动扣【kòu】除每个【gè】读数【shù】的Blank（空白）孔光【guāng】密度值。

注意事项：

1. 用户在初【chū】次使用【yòng】试剂【jì】盒【hé】时，应将各种试剂管离心数【shù】分钟，以便试剂集【jí】中到管底。

2. 每次实验留一孔【kǒng】作为空白调零【líng】孔，该孔不加任何【hé】试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时先【xiān】用此孔【kǒng】调OD值至零。

3. 为防止样【yàng】品蒸【zhēng】发，试验时将反应【yīng】板放于【yú】铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或【huò】覆膜。

4. 未使用完的【de】酶标板或者【zhě】试剂，请于【yú】9-23℃保存，标准品、生物-素标记抗体【tǐ】工作【zuò】液、辣根【gēn】过氧【yǎng】化【huà】物酶标记亲和素工作液请【qǐng】依据所需的量配置使用，请勿重复使用已稀释【shì】过的标准【zhǔn】品、生【shēng】物-素【sù】标记抗体工作液或、辣【là】根【gēn】过氧化【huà】物酶标记【jì】亲【qīn】和素工作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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