大鼠 IL-2 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 IL-2 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将【jiāng】各【gè】种试剂取【qǔ】出放置30分钟，平【píng】衡至【zhì】室温，所有【yǒu】标准品和样品必需【xū】设置平【píng】行对【duì】照实验，快速加入试剂至样品中，立即漩涡【wō】震荡2秒【miǎo】混匀。

1. 依据实验【yàn】键盘【pán】纸决定【dìng】酶标条【tiáo】的使用量，将剩【shèng】余的酶标条连【lián】同干燥【zào】剂一起放回密封塑【sù】料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个【gè】微孔【kǒng】中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特【tè】异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白【bái】）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔、Blank（空白）孔和【hé】NSB（非特【tè】异【yì】结合）孔。

9. 将酶标孔置于孔【kǒng】板振动器【qì】上，250~500rpm，室温孵育2小时【shí】。

10. 在吸水纸上【shàng】拍干微孔内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每孔【kǒng】洗3次，每次【cì】需拍干。

11. 后【hòu】一【yī】次【cì】洗涤，清空各微孔【kǒng】，在【zài】干净的无尘吸水纸上轻【qīng】巧酶标板数次【cì】，以确保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色底物溶液【yè】，于室温静置5~30分【fèn】钟。（显【xiǎn】色【sè】底【dǐ】物A和B需【xū】在临用前15分钟内等体积混【hún】合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标仪Blank（空白）孔值，读取【qǔ】450nm处的光密度值，在570nm至590nm之间好【hǎo】有修正，如【rú】果【guǒ】酶标仪不能自动清除Blank(空白)孔值，那么手【shǒu】动扣除每个读数的【de】Blank（空白）孔光【guāng】密【mì】度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂【jì】盒时，应将各种试剂【jì】管离心数分钟【zhōng】，以【yǐ】便试剂【jì】集中到管底【dǐ】。

2. 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔【kǒng】不加任何【hé】试剂，只是zui后加底【dǐ】物【wù】溶液及2N H2SO4，测量【liàng】时先用此【cǐ】孔调【diào】OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试验时【shí】将反应板【bǎn】放于铺有湿布的密【mì】闭盒【hé】内，酶【méi】标板加上盖或覆【fù】膜。

4. 未【wèi】使用完的酶标板或者试【shì】剂【jì】，请【qǐng】于9-23℃保存，标准品、生物-素标记【jì】抗体工作液、辣根【gēn】过氧化【huà】物酶标记亲和【hé】素工作液【yè】请依【yī】据【jù】所需的量配置使用，请勿重【chóng】复使用【yòng】已稀释过的标准品、生物-素【sù】标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记【jì】亲和素工作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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