大鼠 IL1β ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 IL1β ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将各种试剂取出放【fàng】置30分【fèn】钟，平衡至【zhì】室温，所有标【biāo】准品【pǐn】和样品必需【xū】设置平行对照实验【yàn】，快速加入试剂至样品中，立即【jí】漩涡震荡2秒混【hún】匀。

1. 依据实验键盘纸决【jué】定【dìng】酶标【biāo】条的使【shǐ】用量，将剩余的酶【méi】标【biāo】条连同干燥剂一起放回密封塑料袋，密【mì】封【fēng】，4℃保存。

2. 移【yí】取【qǔ】50μL中和液至各个微孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔【kǒng】和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔【kǒng】中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

8. 移取50μL 抗【kàng】体工作【zuò】液至各孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将【jiāng】酶【méi】标【biāo】孔置于【yú】孔板振【zhèn】动器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸【zhǐ】上拍干微【wēi】孔内溶液【yè】，加洗涤液400μL每孔洗3次【cì】，每次需【xū】拍干。

11. 后一次【cì】洗涤，清空各微孔【kǒng】，在干净的【de】无尘吸水纸上轻【qīng】巧酶【méi】标板数次，以确保没有洗涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底【dǐ】物溶液，于室【shì】温静置5~30分钟。（显色底物A和B需在临用【yòng】前15分钟【zhōng】内【nèi】等【děng】体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白【bái】）孔值，读取450nm处的光密度【dù】值，在【zài】570nm至590nm之间好有修正，如果酶标仪【yí】不能自动【dòng】清【qīng】除Blank(空白)孔值，那【nà】么手动扣除每个读数的【de】Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】光密度值。

注意事项：

1. 用户在初【chū】次使用试剂盒【hé】时【shí】，应将各种【zhǒng】试剂管离心数分钟，以便试剂集中【zhōng】到【dào】管底。

2. 每次实验留一孔作为空【kōng】白调零孔，该孔不加【jiā】任何【hé】试剂，只是zui后【hòu】加底物溶液及2N H2SO4，测量时【shí】先【xiān】用此【cǐ】孔调OD值至零【líng】。

3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿【shī】布的密闭盒内，酶【méi】标【biāo】板【bǎn】加上盖【gài】或覆膜【mó】。

4. 未【wèi】使用完的【de】酶【méi】标【biāo】板或者试剂，请于9-23℃保存，标准品、生物-素标记【jì】抗【kàng】体工作液、辣根过【guò】氧化物酶标【biāo】记亲和素工作液【yè】请【qǐng】依据【jù】所需的量配【pèi】置使用，请勿重【chóng】复【fù】使用已稀释过的标准品、生物-素标记抗体工作液或、辣【là】根【gēn】过氧化物酶标记亲和【hé】素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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